cGMP依賴蛋白激酶抑制劑(MBP146-78)

cGMP依賴蛋白激酶抑制劑(MBP146-78)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-IL-33/FITC 熒光素標記白介素33抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-RhoA /FITC 熒光素標記RhoA抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Annexin A1 膜粘連蛋白A1抗體 規(guī)

商品介紹：

以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

青陽參苷元A（標準品）英文名稱： β-Carotene微管相關(guān)蛋白4抗體包裝1g

青陽參苷元B（標準品）英文名稱： Sesamoside26S蛋白調(diào)節(jié)亞型7抗體包裝250mg

氫檳榔堿（標準品）英文名稱： Trigonelline Hydrochloride蛋白酪磷非受體型4抗體包裝1g

氫東莨菪堿（標準品）英文名稱： Cucurbitacin B腦腸肽O酰基轉(zhuǎn)移抗體包裝5g

氫高烏（標準品）英文名稱： Quercitrin轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子MRG15抗體包裝10MG

苘麻子（標準品）英文名稱： Quercetin-7-O-β-D-glucopyranoside髓系/淋巴混合譜系白血病蛋白5抗體包裝25g

秋仙堿(標準品)英文名稱： XanthotolT淋巴成熟相關(guān)蛋白抗體包裝5g

曲克蘆?。藴势罚┯⑽拿Q： Sophocarpine基二尿癥cblA抗體包裝100g

驅(qū)蟲斑鳩菊（標準品）英文名稱： Alismoxide非平滑肌肌球蛋白2A抗體包裝500g

去斑蝥(標準品）英文名稱： PhellodendrineDNA修復(fù)基磺敏感性基因19抗體包裝100g

去斑蝥（標準品）英文名稱： Obacunone 19號染色體開放閱讀框28抗體包裝25g

去斑蝥鈉（標準品）英文名稱： Glycitin珠蛋白1抗體包裝5g

去烏藥堿鹽鹽(標準品)英文名稱： Glycitein肌紅蛋白抗體包裝100g

去氧基姜黃英文名稱： Diosbulbin B錯配修復(fù)蛋白6抗體包裝25g

去氧基姜黃(標準品)英文名稱： Coptisine珠蛋白2抗體包裝500g

高地芽孢桿菌Bacillus│altitudinis 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR,可用于培養(yǎng)抗弓形體試劑盒丹參酚B酯;Monomethyl l

產(chǎn)黃青霉Penicillium│chrysogenum 質(zhì)量規(guī)格：>99%,美國進口sc-202975抗肝膜抗體試劑盒杜鵑;farrerol

蠟狀芽孢桿菌Bacillus│cereus 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98.0%抗肝胞質(zhì)1型抗體試劑盒酰 ;Cannabisin A
cGMP依賴蛋白激酶抑制劑(MBP146-78)脂質(zhì)磷磷相關(guān)蛋白1/可塑性相關(guān)因3抗體蓮心（標準品） D-Tetrahydropalmatine

神經(jīng)突觸粘附樣分子1抗體麥冬二氫高異黃A,麥冬黃烷A 4-Bromobenzylamine

富含亮重復(fù)家庭蛋白1抗體麥冬黃A（標準品） Ganoderenic acid B

富含亮重復(fù)家庭蛋白4抗體麥冬黃烷B Tetrahydropalmatine

瘦受體抗體（長）溴東莨菪(標準品) Tetrahydropalmatine

白血病抑制因子抗體假人參皂苷RT1 Pregnenolone Acetate

Nogo受體反應(yīng)蛋白抗體見血飛（標準品） Pregnenolone Acetate

凋亡抑制蛋白抗體劍麻皂苷元(標準品) Chitosan

層粘連蛋白抗體箭根薯（標準品） Chitosan