HIV-1蛋白酶抑制劑（Atazanavir sulfate）

HIV-1蛋白酶抑制劑（Atazanavir sulfate）公司*的產(chǎn)品：Anti-Phospho-LAT (Tyr171) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化T細(xì)胞活化連接蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-SPHK1/FITC 熒光素標(biāo)記鞘氨醇激酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus an

產(chǎn)品屬性：

中文名稱(chēng)：HIV-1蛋白酶抑制劑（Atazanavir sulfate）

英文名稱(chēng)：Atazanavir sulfate

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。

南沙參（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Triflumuron磷化GADD153抗體包裝250mg

南山楂（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： PencycuronG蛋白αS抗體（鳥(niǎo)嘌呤核苷結(jié)合蛋白Gα s）包裝1g

南五味子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Hexythiazox solutionG蛋白β4抗體/鳥(niǎo)嘌呤核苷結(jié)合蛋白β亞基4包裝250mg

鬧羊花II英文名稱(chēng)： Hexythiazox solutionG蛋白β2抗體/鳥(niǎo)嘌呤核苷結(jié)合蛋白β亞基2包裝1g

鬧羊花III英文名稱(chēng)： Imazalil solutionG蛋白γ2抗體/鳥(niǎo)嘌呤核苷結(jié)合蛋白γ2抗體包裝5g

鬧羊花V英文名稱(chēng)： Siduron磷化糖原合激3β抗體包裝100g

鬧洋花（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： SimazineG蛋白偶聯(lián)受體GPR92蛋白抗體包裝25g

擬人參皂苷F11(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： Simazine solution己糖6磷脫氫抗體包裝500g

擬人參皂苷Rh2(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)：  Phoxim solutionG蛋白偶聯(lián)受體γ14抗體包裝5g

擬人參皂苷RT5(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： Phoxim solution腸高血糖相關(guān)肽抗體包裝100g

鳥(niǎo)苷英文名稱(chēng)： Pirimicarb solution葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白10抗體包裝25g

尿囊（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Pyrazosulfuron腸高血糖相關(guān)肽抗體包裝500g

檸檬苦，黃柏內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品,橙皮提取)英文名稱(chēng)： PretilachlorG蛋白偶聯(lián)受體120抗體包裝1g

檸檬苦；吳茱萸內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品,吳茱萸提取)英文名稱(chēng)： Pretilachlor solutionG蛋白偶聯(lián)受體40抗體包裝25g

牛白藤（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Propoxur solution20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框100抗體包裝5g

克魯弗酵母克魯弗變種Saccharomyces│kluyveri var. kluyveri 質(zhì)量規(guī)格：標(biāo)準(zhǔn)品,用于含量測(cè)定皮膚淋巴相關(guān)抗原試劑盒木犀草苷;Cynaroside

枯草芽孢桿菌枯草亞種Bacillus│subtilis subsp. subtilis 質(zhì)量規(guī)格：>99%,JP16皮膚蛋白試劑盒迷迭香;Rosmarinic acid

: Yt17資源名稱(chēng): 假絲酵母 質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP34,BR,可用于培養(yǎng)皮動(dòng)蛋白試劑盒牡荊;Vitexin
HIV-1蛋白酶抑制劑（Atazanavir sulfate）陽(yáng)離子通道相關(guān)蛋白β亞抗體奧沙普秦（標(biāo)準(zhǔn)品） Verapamil HCl

特異性蛋白57抗體奧硝唑（標(biāo)準(zhǔn)品） Verapamil HCl

L選擇抗體奧扎格雷（標(biāo)準(zhǔn)品） Mycophenolic acid

CD53抗體奧扎格雷鈉（標(biāo)準(zhǔn)品） Mycophenolic acid

死亡同源蛋白6抗體巴卡丁 III（標(biāo)準(zhǔn)品） Amoxicillin

離子通道KB抗體巴柳氮鈉（標(biāo)準(zhǔn)品） Amoxicillin

C型凝集結(jié)構(gòu)域家族12成員A抗體巴龍霉（標(biāo)準(zhǔn)品） Fenofibrate

離子通道蛋白2抗體巴芬(標(biāo)準(zhǔn)品) Fenofibrate

C型凝集結(jié)構(gòu)域家族9成員A抗體巴芬雜質(zhì)A（標(biāo)準(zhǔn)品） Probenecid 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)