PI3K抑制劑(PF-4989216)

PI3K抑制劑(PF-4989216)公司*的產(chǎn)品：Anti-PI3K/P85 alpha/FITC 熒光素標記磷脂酰肌醇激酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti-human sIgA 兔抗人分泌型IgA (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg
磷脂酰基醇蛋白聚糖-3抗體 Anti-GPC3 0.

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：PI3K抑制劑(PF-4989216)

英文名稱：PF-4989216

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細胞生物學研究有以下幾個方面：

細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細胞核、染色體以及基因表達的研究；

②生物膜與細胞器的研究；

③細胞骨架體系的研究；

④細胞增殖及其調(diào)控；

⑤細胞分化及其調(diào)控；

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細胞的起源與進化；

⑧細胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

小鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒 ，英文名： t-PA ELISA Kit

小鼠磷酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA檢測試劑盒MousePhosphotylinosital3kinase,PI3KELISAKit 96T/48T

人抗促卵泡素抗體(Ai FSH Ab)免疫試劑盒 Human Ai FSH Ab ELISA Kit

rabbitThyroidStimulatingHormone,TSHELISAKit兔子促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細胞CDK4蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20次

Humanβamyloidprecursorprotein,βAPPELISA試劑盒人淀粉樣前體蛋白(βAPP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠白介素33(IL-33)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-33 ELISA Kit

大鼠血小板因子3(PF-3)ELISA檢測試劑盒Ratplateletfactor3,PF3ELISAKit 96T/48T

人T細胞活化連接蛋白(LAT)免疫試劑盒 Human LAT ELISA Kit

英文名稱MouseEpinephrineELISAKit小鼠腎上腺素(Epinephrine)規(guī)格：96T/48T

TEM電鏡石蠟切片免疫組織化學HRP酶聯(lián)DAB間接檢測試劑盒(含HRP二抗)20次

RabbitLysozyme,LZMELISA試劑盒兔溶菌酶(LZM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

豬中性粒細胞明膠酶相關脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human melanoma associated aigen (MAGE) ELISA Kit 人黑色素瘤相關抗原(MAGE)ELISA試劑盒

Rabbitpigmeepithelium-derivedfactor,PEDFELISAKit 兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝

CLIAKitforapo-A5(HumanapoproteinA5)ELISAKit人載脂蛋白A5規(guī)格：48T/96T

血清/血漿游離脂肪酸酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒10次

Porcineleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISAKit豬白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
PI3K抑制劑(PF-4989216)synaptotagmin-2 英文名稱： 突觸結合蛋白相關基因2抗體 0.1ml

phospho-MEK1 + MEK2 (Ser222 + Ser226) 英文名稱： 磷酸化原活化蛋白激酶1抗體 0.1ml

CD3抗體 Anti-CD3 0.1ml

Anti-VDCC-L Beta/FITC 熒光素標記L-型電壓依賴型鈣通道β抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-GSK3 alpha(Ser21) 磷酸化葡萄糖合成激酶3α抗體 GSK3α(Phospho-Ser21) 規(guī)格 0.1ml

CD62L (ELAM-1/L-Selectin ) L選擇素抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg