商品介紹:
CDK7-IN-1是一種細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶7(cdk7)抑制劑,IC50值小于100nM,來自WO2016105528A2化合物實(shí)例215。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1957203-02-9 純度:99.82% 分子量:517.62 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:cdk7抑制劑(CDK7-IN-1)
英文名稱:CDK7-IN-1
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
小鼠中性粒細(xì)胞激活蛋白3(NAP3)ELISA試劑盒 ,英文名: NAP3 ELISA Kit
犬組胺(HIS)ELISA檢測(cè)試劑盒CanineHistamine,HISELISAKit 96T/48T
犬三碘甲狀腺原氨酸(T3)免疫試劑盒 Canine i-iodothyronine,T3 ELISA Kit
英文名稱HumaninducibleniicoxidesyhaseELISAKIT人誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)規(guī)格:96T/48T
蟲卵細(xì)胞活力和死亡細(xì)胞流式定量檢測(cè)試劑盒20次
RatHelicobacterpyloriIgG,Hp-IgGELISA試劑盒大鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素15(IL15)ELISA試劑盒 ,英文名: IL15 ELISA Kit
人二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA檢測(cè)試劑盒HumandipeptidylpeptldaseⅣ,DPPⅣELISAKit 96T/48T
大鼠金屬硫蛋白(MT)免疫試劑盒 Rat Metallothionein,MT ELISA Kit
英文名稱Ratα-L-fucosidaseausefulELISAKit大鼠α-L-巖藻糖苷酶(AFU)規(guī)格:96T/48T
咖啡甘素(dulcin)含量薄層色譜法定性檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitASGPR人去唾液酸糖蛋白受體規(guī)格:48T/96T
豬藍(lán)耳病抗體(PRRS-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human basic fibroblast growth factor 6 (bFGF-6) ELISA Kit 人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子6(bFGF-6)ELISA試劑盒
Porcineoxidizedlowdensitylipoprotein,OxLDLELISAKit 豬氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
CLIAKitforAMA(MouseAi-myocardialaibody)ELISAKit小鼠抗心肌抗體規(guī)格:48T/96T
血液過氧化氫(HYDROGENPEROXIDE)活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒20次
Porcineacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISAKit豬乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
cdk7抑制劑(CDK7-IN-1)SLC2A4RG 英文名稱: 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4增強(qiáng)因子抗體 0.2ml
FASTKD2 英文名稱: Fas活化激酶結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 0.2ml
巨噬細(xì)胞炎癥因子1β 抗體 Anti-MIP-1β 0.2ml
Anti-S100A13/FITC 熒光素標(biāo)記鈣結(jié)合蛋白S100A13抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-PDPK1(Ser410) 磷酸化3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體 規(guī)格 0.1ml
PAR-2 OP(Protease-activated receptors-2 Activating Orange-peptide) 蛋白酶激活受體-2桔抗肽Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg