Thomas磷鉬酸蘇木素染色液

Thomas磷鉬酸蘇木素染色液公司正在出售的產(chǎn)品：B7-H1/PDL1/CD274 /FITC 熒光標(biāo)記程序性死亡配體1抗體IgG鉻銫 AR，99.5%
B7-H4/FITC 熒光標(biāo)記B7H4抗體IgG四鋰 99%
BACE/ASP2 /FITC 熒光標(biāo)記β分泌抗體IgG四鋰 99.9%
Bad/FITC 熒光標(biāo)記相關(guān)死亡促進因子Bad抗體IgG四鋰 99.99%
Bad/FITC 熒光

商品介紹：

以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

矮地茶（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Fluorescein免疫球蛋超家族成員8抗體包裝5g

艾黃;六棱菊亭(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Calcein白介33抗體包裝25g

艾葉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Wright's stain核蛋白9抗體（Ran結(jié)合蛋白M）包裝25ml

安格洛苷 C（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Giemsa stain真核翻譯起始因子3A抗體包裝5ml

安石榴甙（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 6-Carboxyfluorescein N-hydroxysuccinimide ester磷化真核翻譯起始因子4G抗體包裝1g

安五脂（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 6-Carboxyfluorescein整合α4β7抗體包裝5g

安息香（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 5-Carboxyfluorescein磷化干擾調(diào)節(jié)因子3抗體包裝10MG

澳茄新堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Nigrosine water solubleISLR2蛋白抗體包裝1g

澳洲茄;澳州茄（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Nigrosin alcohol solubleIQCG蛋白抗體包裝250mg

澳洲茄邊堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 7-HydroxycoumarinIQCK蛋白抗體包裝1g

澳洲茄堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： HeminDNA結(jié)合抑制因子1抗體包裝250mg

八角楓（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 5-Carboxyfluorescein diacetate肌苷單磷脫氫1抗體包裝25g

八角茴香（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 5(6)-Carboxyfluorescein diacetate干擾誘導(dǎo)蛋白P78抗體包裝5g

八角蓮（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 5-Aminofluorescein間粘附分子5抗體包裝100g

八角麻（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 6-Aminofluorescein肌單磷IMPA3抗體包裝25g

#固氮菌Azotobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格：Mw:63000~77000,USP32類似RIKEN cDNA 4931408D14 基因 絞股藍皂苷XLIX;Gypenoside

微桿菌屬Microbacterium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：Mw35 000 to 45 000類似cDNA順序BC027382 絞股藍皂苷;Gynostemma Pen

猴頭菇Hericium│erinaceus 質(zhì)量規(guī)格：MW:16000~24000類免疫缺陷病試劑盒5-O-基維斯阿米苷;5-O-Met
Thomas磷鉬酸蘇木素染色液費爾氏酵母 3,5-二溴苯甲酪氨酸羥化Elisa

釀酒酵母 甘氨酰-L-谷氨酸色C氧化Elisa

大毛霉 Ketanserin鞘氨-1-磷酸Elisa

稻田彎曲嗜酸 二甲基二烯基氯化銨鞘氨Elisa

朱黃籃狀 烯酸二環(huán)戊基酯堿性焦磷酸Elisa

膠孢 二乙氧基烷苯氨酸解氨Elisa

小孢根霉須狀變種 西洛他唑磺基轉(zhuǎn)移 1A1Elisa

假單胞屬 4-(二氟甲氧基)苯甲磺基轉(zhuǎn)移 2A1Elisa

新城疫病 4-Boc-氨基β-酮脂酰-CoA合Elisa

核盤 2,4,6-三氯苯酸β-酮脂酰-CoA合Elisa

芽胞桿 1-庚炔-3-纖維Elisa

溶淀粉類芽孢桿 叔丁氧羰基-L-谷氨酸 5-環(huán)己酯3-氧?；?酰基載體蛋白還原Elisa

岸邊亞硫酸鹽桿 1,2-雙(基硅氧基)乙烷油體相關(guān)蛋白Elisa

樟疫霉 對氨基苯甲酰-β-氨酸末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移Elisa

深層大洋芽孢桿 泛影酸鈉末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移Elisa