以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
LSD1抑制劑(GSK2879552) | GSK2879552 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
GSK2879552是一種不可逆的LSD1抑制劑,具有抗腫瘤活性。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1401966-69-5 純度:99.82% 分子量:364.48 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
中國(guó)漢納酵母鋅指蛋白103抗體Human POLM ELISA Kit血管緊張1-7(Ang1-7)
沙福芽孢桿菌纖維母生長(zhǎng)因子7抗體Human POLR1C ELISA Kit血管緊張(ANG)
大豆慢生根瘤菌肺Kruppel樣因子抗體Human POLR1A ELISA Kit血管活性肽抑制劑(VPI)
希瓦氏菌*激肽釋放5抗體Human POLR2J ELISA Kit血管活性腸肽(VIP)
白乳菇激肽釋放13抗體Human POLE3 ELISA Kit血管動(dòng)蛋白(AMOT)
Termitomyces bulborhizus 激肽釋放15抗體Human POLG2 ELISA Kit旋毛蟲(chóng)抗體(Trichinella Ab)
白假絲酵母激肽釋放2抗體Human POLI ELISA Kit溴脫氧核苷尿嘧啶(BrdU)
米根霉激肽釋放12抗體Human POLM ELISA Kit雄烯二(ASD)
雞、滑液支原體(-)陰性血清G蛋白偶聯(lián)受體54抗體Human POLR1A ELISA Kit雄激受體(AR)
耐冷冷桿菌驅(qū)動(dòng)蛋白家族KIF17抗體Human POLR1C ELISA Kit雄激結(jié)合蛋白(ABP)
臭曲霉轉(zhuǎn)錄因子KLF9抗體Human POLR1D ELISA Kit胸腺依賴(lài)性抗原(TD-Ag)
皮狀絲孢酵母上皮特異性蛋白1抗體Human POLR1E ELISA Kit胸腺五肽(TP-5)
西藏木霉磷化離子通道蛋白Kv3.1抗體Human POLG2 ELISA Kit胸腺肽β4(Thymosin β4)
科羅拉多擬無(wú)枝菌周期基因1蛋白抗體Human POLI ELISA Kit胸腺肽α1(Thymosin α1)
粒狀青霉驅(qū)動(dòng)蛋白KIF5B抗體Human PNRC1 ELISA Kit胸腺肽(Thymosin)
木耳kelch樣蛋白13抗體Human LTC4S(Leukotriene C4 synthase) ELISA Kit胸腺嘧啶核苷磷化(TP)
不解糖假蒼白桿菌Pseudochrobactrum│asaccharolyticum 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)高三尖杉酯堿
哲拉什黃桿菌Flavobacterium│degerlachei 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)(T)化兩面針堿
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)血根堿
LSD1抑制劑(GSK2879552)禾谷鐮刀 2,3-吡啶二羧酸酐成纖維生長(zhǎng)因子21Elisa
變異棒桿 2,6-二羥基苯乙酮神經(jīng)生長(zhǎng)因子Elisa
芽孢桿 2-苯硫基乙Ⅰ型前膠原羧基端肽Elisa
普通鏈霉 4-苯乙神經(jīng)肽SElisa
根瘤 叔丁基二甲基硅烷基三氟磺酸酯二肽基肽ⅣElisa
抗輻射不動(dòng)桿 6--1,3-二甲基尿嘧啶半胱氨酸蛋白3Elisa
豬屎豆根瘤 3-甲氧基芐半胱氨酸蛋白6Elisa
枯草芽孢桿 6-氨基吲唑半胱氨酸蛋白8Elisa
戊糖片球 4-甲氧基苯硫酚半胱氨酸蛋白9Elisa
豬丹絲 4-苯甲半胱氨酸蛋白7Elisa
黃色短桿 2,5-二甲氧基四肌酸激同工MBElisa
德氏乳桿德氏亞種 5-尿嘧啶肌酸激Elisa
黑曲霉 2,3,5-基吡啶α羥基丁酸脫氫Elisa
大腸埃希 2-(甲基)吡啶鹽酸鹽過(guò)氧化物Elisa
紅霉鏈霉 2,2-雙[4-(4-氨基苯氧基苯)]六氟烷過(guò)氧化物Elisa