VEGFR2抑制劑（Cediranib maleate）

VEGFR2抑制劑（Cediranib maleate）公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-Phospho-PKA C (Thr197)/FITC 熒光素標記磷酸化蛋白激酶C亞性抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Donkey Anti-human IgG 驢抗人IgG (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg
肝細胞生長因子激活物

以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
玫瑰色鹽水球菌Bacillus cereus

大腸埃希氏菌Bacillus cereus

宇佐曲霉Bacillus cereus

枯草芽孢桿菌Bacillus cereus

*薔薇放線孢Geobacillus stearothermophilus

簇生黃韌傘Agromyces mediolanus

假單胞菌Agromyces mediolanus

奶酪假絲酵母Rhodococcus ruber

豌豆根瘤菌Rhodococcus pyridinivorans

小孢根霉華變種Geobacillus stearothermophilus

棘孢曲霉Bacillus sp.

野油菜黃單孢菌Bacillus cereus

熒光假單胞菌Bacillus sp.

釀酒酵母Bacillus sp.

綠孢環(huán)柄菇Bacillus sp.

星狀諾氏菌Bacillus sp.

豬脂蛋白α(Lp-α)免疫試劑盒磷化失調(diào)癥蛋白1抗體人結(jié)締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ) 巴豆苷

豬正常T表達和分泌因子(RANTES/CCL5)免疫試劑盒脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體人結(jié)締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ) 巴亭III

豬粘膜血管地址黏附分子1(MADCAM1)免疫試劑盒磷化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體人免疫球蛋白A Fc段受體Ⅰ(FcαRⅠ/CD89) 巴馬亭紅堿

豬粘蛋白/粘液5B(MUC5B)免疫試劑盒磷化凋亡信號調(diào)節(jié)激1抗體人免疫球蛋白A Fc段受體Ⅰ(FcαRⅠ/CD89) 巴西蘇木
VEGFR2抑制劑（Cediranib maleate）ZBTB43 英文名稱： 鋅指蛋白297B抗體 0.2ml

DMPK 英文名稱： 肌強直性營養(yǎng)不良蛋白激酶抗體 0.2ml

重組膜粘連蛋白-5(人)抗體 Anti-Annexin V 0.1ml

Anti-TORC1/CRTC1/FITC 熒光素標記環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-ERK1(Thr202/Tyr204)+ERK2(Thr183/Tyr185) 磷酸化原活化蛋白激酶1/2抗體 規(guī)格 0.1ml

Defensin Beta1 防御素β1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg