IMPDH抑制劑（AVN-944）

IMPDH抑制劑（AVN-944）公司*的產(chǎn)品：prox-1 /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠prox-1蛋白抗體IgG
PSCA /FITC 熒光標(biāo)記抗前列腺干抗原抗體IgG
PSD93/FITC 熒光標(biāo)記突觸后密度蛋白93抗體IgG
Phospho-PSD93 (Tyr340) /FITC 熒光標(biāo)記化突觸后密度蛋白93抗體IgG
PSD-95/FITC 熒光標(biāo)記突觸后密度

產(chǎn)品屬性：

中文名稱(chēng)：IMPDH抑制劑（AVN-944）

英文名稱(chēng)：AVN-944

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

葡枝根霉Escherichia coli大鼠視黃結(jié)合蛋白(RBP)

棒狀雙歧桿菌Escherichia coli大鼠促性腺激釋放激受體抗體(GNRHR-Ab)

枝狀枝孢菌Escherichia coli大鼠促性腺激釋放激受體抗體(GNRHR-Ab)

芽孢桿菌Escherichia coli大鼠血管性血友病因子裂解蛋白(ADAMTS13/vWF-cp)

枯草芽孢桿菌Escherichia coli大鼠血管性血友病因子裂解蛋白(ADAMTS13/vWF-cp)

變異棒桿菌Escherichia coli大鼠主要堿性蛋白(MBP)

木霉屬Escherichia coli大鼠主要堿性蛋白(MBP)

萬(wàn)壽菊黃色桿菌Escherichia coli大鼠嗜性粒陽(yáng)離子蛋白(ECP)

局限青霉Escherichia coli大鼠嗜性粒陽(yáng)離子蛋白(ECP)

盤(pán)長(zhǎng)孢狀盤(pán)孢Escherichia coli大鼠鈣調(diào)磷(CaN)

蘑菇Escherichia coli大鼠鈣調(diào)磷(CaN)

皺褶青霉Escherichia coli大鼠抑制結(jié)合蛋白(INHBP)

褐平臍蠕孢Escherichia coli大鼠抑制結(jié)合蛋白(INHBP)

嗜幾丁質(zhì)芽孢桿菌Escherichia coli大鼠抗甲狀腺過(guò)氧化物抗體(TPO-Ab)

魯?shù)劓溍咕?/span>Escherichia coli大鼠抗甲狀腺過(guò)氧化物抗體(TPO-Ab)

黃綠木霉Escherichia coli大鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)

蛋白體復(fù)合物C5抗體小孔異擔(dān)子菌花鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞

磷脂A2激活蛋白抗體光核纖孔菌花鼠腎上皮樣細(xì)胞

胸苷磷化抗體齒白木層孔菌銀星竹鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞

早老蛋白-2抗體擬緣小孔菌姬鼠皮膚細(xì)胞
IMPDH抑制劑（AVN-944）淺灰鏈霉 L-蛋（甲硫)

香魚(yú)假單胞 DL-蛋（甲硫)

枯草芽孢桿 醋酸辛酯

冬蟲(chóng)夏草（冬蟲(chóng)夏草，蝙蝠蛾被毛孢，中華被毛孢） 蟲(chóng)草

東方伊薩酵母 補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲

芽孢桿屬 補(bǔ)骨脂二氫黃酮

墻支頂孢 補(bǔ)骨脂定

毛霉 表兒茶

蘋(píng)果輪紋 表白樺脂酸

洋蔥伯克霍爾德 L-苯

光帽鱗傘(滑菇) D-半乳糖

 β-

江西盤(pán)孢 L-

無(wú)殼曲霉 γ-氨基丁酸

葡萄白腐 1,8-桉葉 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)