商品介紹:
CPI-169racemate是CPI-169的消旋體。CPI-169是高活性EZH2抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1450655-76-1 純度:96.73% 分子量:528.66 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:EZH2抑制劑(CPI-169 racemate)
英文名稱:CPI-169 racemate
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
大腸埃希氏菌Bacillus thuringiensis雞弓形蟲循環(huán)抗原(TCA)
小孢根霉華變種Bacillus thuringiensis雞甲狀旁腺激(PTH)
假單孢菌Bacillus thuringiensis雞甲狀旁腺激(PTH)
咸海鮮芽孢桿菌Bacillus thuringiensis雞卵黃免疫球蛋白(IgY)
根瘤菌Bacillus thuringiensis雞卵黃免疫球蛋白(IgY)
泡盛曲霉Bacillus thuringiensis雞蛋卵黃高磷蛋白磷肽(PPP)
煙曲霉Bacillus thuringiensis雞蛋卵黃高磷蛋白磷肽(PPP)
球孢白僵菌Bacillus thuringiensis雞脂多糖/內(nèi)(LPS)
根瘤菌Bacillus thuringiensis雞脂多糖/內(nèi)(LPS)
異常威克漢姆酵母Bacillus thuringiensis雞β干擾(IFN-β/IFNB)
根霉屬Bacillus thuringiensis雞β干擾(IFN-β/IFNB)
果生鏈核盤菌Bacillus thuringiensis雞免疫球蛋白E(IgE)
釀酒酵母Bacillus thuringiensis雞免疫球蛋白E(IgE)
雞腿菇Bacillus thuringiensis雞免疫球蛋白A(IgA)
相思根瘤菌Bacillus thuringiensis雞免疫球蛋白A(IgA)
糙皮側(cè)耳Bacillus thuringiensis雞腫瘤壞死因子α(TNF-α)
血影蛋白A鏈紅細(xì)胞型/收縮蛋白/Spectrinα抗體蘇云金芽胞桿菌猝倒亞種胞內(nèi)分枝桿菌
突觸結(jié)合蛋白相關(guān)基因2抗體蘇云金芽胞桿菌蘇云金變種副結(jié)核分枝桿菌
信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子2抗體蘇云金芽胞桿菌庫爾斯塔克亞種綿羊肺炎支原體
生長抑受體1抗體蘇云金芽胞桿菌以色列亞種馬媾疫錐蟲
EZH2抑制劑(CPI-169 racemate)ZBTB42 英文名稱: 鋅指蛋白925抗體 0.2ml
DTX2 英文名稱: 鋅離子結(jié)合蛋白DTX2抗體 0.2ml
整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型(抗體) Anti-ADAM-TS1/METH1 0.1ml
Anti-RAMP-1/RBITC 紅色羅丹明標(biāo)記受體活性調(diào)制蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-FER/TYK3(Tyr402) 磷酸化酪氨酸蛋白激酶3抗體 規(guī)格 0.1ml
MK1/MAPKK1(mitogen activated protein kinase kinase 1) MK1/MAPKK1抗體(N-端)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg