商品介紹:
IC261是一種新型CK1抑制劑,作用于細胞有絲分裂,IC261抑制CK1,IC50值為16μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:186611-52-9 純度:98.97% 分子量:311.33 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
CK1抑制劑(IC261) | IC261 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
大腸桿菌受體型酪激(抗原)Anti-GJB7 Antibody人肝輔因子Ⅱ(HCⅡ)
萎蔫短小桿菌微管相關(guān)蛋白(抗原)Anti-GJC2 Antibody人肝輔因子Ⅱ(HCⅡ)
毛柄金錢菌(金針菇)CD90Anti-GK3P Antibody人膽(CA)
聚生殼菌硫酯包含蛋白-1(抗原)Anti-GK2 Antibody人膽(CA)
短密青霉P53誘導(dǎo)糖酵解和凋亡調(diào)節(jié)因子蛋白(抗原)Anti-GK3P Antibody人幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)
擬熱帶假絲酵母金屬蛋白組織抑制因子-4(抗原)Anti-GLB1L3 Antibody人幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)
圍小叢殼菌甲狀腺過氧化物(抗原)Anti-GLB1L3 Antibody人γ谷酰轉(zhuǎn)移(GGT)
尖孢枝孢促甲狀腺受體(抗原)Anti-GLI1 Antibody人γ谷酰轉(zhuǎn)移(GGT)
涎沫假絲酵母淋巴生成-1(抗原)Anti-GLB1 Antibody人胃粘液(GM)
鏈單孢菌甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-2(抗原)Anti-GLI2 Antibody人胃粘液(GM)
類芽胞桿菌酪(多肽抗原)Anti-GLRB Antibody人透明質(zhì)結(jié)合蛋白(HABP)
優(yōu)紅游動菌尿鹽重吸收轉(zhuǎn)運子1 (抗原)Anti-GLRB Antibody人透明質(zhì)結(jié)合蛋白(HABP)
慶豐鏈霉菌血管粘附蛋白1(多肽抗原)Anti-GLI3 Antibody人Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)
紅色紅曲波形蛋白(抗原)Anti-GLYCTK Antibody人Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)
嗜石油腐皮鐮孢VSIG4 T淋巴負調(diào)節(jié)蛋白之一(抗原)Anti-GLYCTK Antibody人幽門螺旋桿菌IgM(Hp-IgM)
蠟狀芽孢桿菌一種新的絲/蘇激家族成員的基因WNK4(多肽抗原)Anti-GM-CSF(CSF2) Antibody人幽門螺旋桿菌IgM(Hp-IgM)
彈性蛋白抑制劑抗體魯氏結(jié)合酵母人卵巢畸胎瘤細胞
上皮鈉通道β抗體頭狀絲孢酵母人乳腺導(dǎo)管瘤細胞
新朊蛋白抗體C端乳鏈球菌小鼠網(wǎng)織細胞肉瘤
S100鈣結(jié)合蛋白A7抗體Marivitacryptomonadis人臍靜脈內(nèi)皮細胞(人膀胱癌細胞污染)
CK1抑制劑(IC261)皺褶假絲酵母 甘油三丁酸酯
豌豆根瘤 腐殖酸
梭 γ-亞麻酸
池塘玫瑰單胞 α-亞麻酸
豌豆根瘤 α-亞麻酸
草假單胞 溴化乙酰
類芽胞桿 化肉豆蔻酰
南假單胞 對氨基二乙基苯硫酸鹽
pMAL-p2x 七葉苷
枯草芽孢桿 茶皂
大豆慢生根瘤 角豆膠
串珠鐮孢* 苯酮酸
罕見斯多維氏 羧甲淀粉鈉
三隔鐮刀 聚烯酸樹脂Ⅳ
大腸埃希 聚烯酸樹脂Ⅲ