商品介紹:
Kevetrin鹽酸鹽是一種腫瘤抑制蛋白p53的激動劑,具有潛在的抗腫瘤活性。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:66592-89-0 別名:4-Isothioureidobutyronitrile hydrochloride;thioureidobutyronitrile hydrochloride;thioureido butyronitrile hydrochloride 分子量:179.67 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
乙型肝炎e抗原(HBeAg)ELISA Kit英文名稱:HBeAg ELISA KitADCK1蛋白抗體包裝25g
乙型肝炎e抗體(HBeAb)ELISA Kit英文名稱:HBeAb ELISA Kit?;Y(jié)合結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體包裝5g
乙酰(acetyl-CoA)ELISA Kit英文名稱:acetyl-CoA ELISA Kitα/β解4抗體包裝1g
乙酰膽堿轉(zhuǎn)移(CHAT)ELISA Kit英文名稱:CHAT ELISA KitADCK2蛋白抗體包裝250mg
乙酰膽堿酯(AchE)ELISA Kit英文名稱:AchE ELISA Kit乙脫氫16家庭A1抗體包裝1g
乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA Kit英文名稱:AChRab ELISA Kit粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體包裝1g
乙酰膽堿(ACH)ELISA Kit英文名稱:ACH ELISA Kit乙脫氫1抗體包裝250mg
胰脂肪(PL)ELISA Kit英文名稱:PL ELISA Kitδ基乙酰脫抗體包裝1g
胰激肽原(PK)ELISA Kit英文名稱:PK ELISA Kit肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白4抗體包裝500mg
胰高血糖樣肽2(GLP-2)ELISA Kit英文名稱:GLP-2 ELISA Kitα2巨球蛋白(α-2M)抗體包裝250mg
胰高血糖樣肽1(GLP-1)ELISA Kit英文名稱:GLP-1 ELISA KitACCSL蛋白抗體包裝500mg
胰高血糖(GC)ELISA Kit英文名稱:GC ELISA Kit胎蛋白抗體包裝100mg
胰淀(Amylin)ELISA Kit英文名稱:Amylin ELISA Kitβ淀粉樣前體蛋白結(jié)合蛋白3抗體包裝25g
胰島細(xì)胞抗體(ICA)ELISA Kit英文名稱:ICA ELISA Kit星形肌動蛋白抗體包裝1g
胰島自身抗體(IAA)ELISA Kit英文名稱:IAA ELISA Kit系統(tǒng)性紅斑狼瘡相關(guān)蛋白TREX1抗體包裝5g
激活受體2A抗體胱天蛋白14(CASP14)Selumetinib (AZD6244) is a potent, highly selective MEK1 inhibitor with IC50 of
p53激動劑(Kevetrin hydrochloride)生物偶聯(lián)血藍(lán)蛋白表戈米辛O(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
生物偶聯(lián)牛血清白蛋白表沒食子兒茶(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
BK通道蛋白多肽表沒食子兒茶沒食子酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2表木栓(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白7表小檗(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
炭疽桿菌菌體蛋白別隱品;A-別隱品(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
CD105蛋白濱蒿內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
瓜環(huán)肽檳榔(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
C-反應(yīng)蛋白(抗原)檳榔花(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat