公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:GFP表達抑制劑(Ribocil)
英文名稱:Ribocil
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
Ribocil是一種高度選擇性的化學調(diào)節(jié)劑,調(diào)節(jié)細菌核糖核黃素核開關(guān),Ribocil強烈抑制GFP表達,EC50值為0.3μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1381289-58-2 純度:99.08% 分子量:382.48 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
沙棘(標準品)英文名稱: Oroxin B激-M2包裝100g
沙棘膏(標準品)英文名稱: Fosfomycin tromethamine間皮抗體包裝25g
沙苑子(標準品)英文名稱: Fosfomycin tromethamine基質(zhì)金屬蛋白-1抗體包裝100g
沙苑子苷(標準品)英文名稱: Cynaroside基質(zhì)金屬蛋白-1抗體包裝25g
沙苑子苷A(標準品)英文名稱: Costundide基質(zhì)金屬蛋白13抗體包裝5g
砂仁(陽春砂)(標準品)英文名稱: Pseudoginsenoside F11基質(zhì)金屬蛋白-14抗體包裝100ml
山茶甙A英文名稱: Pseudoginsenoside RT5基質(zhì)金屬蛋白2抗體包裝25ml
山茶甙B英文名稱: Allantoin基質(zhì)金屬蛋白3抗體包裝250mg
山茶苷A英文名稱: Limonin基質(zhì)金屬蛋白-7抗體包裝100mg
山豆根(標準品)英文名稱: Limonin基質(zhì)金屬蛋白-9抗體包裝1g
山風(標準品)英文名稱: Limonin髓鞘少樹突膠質(zhì)糖蛋白抗體包裝500mg
山姜(標準品)英文名稱: Stearic acid多藥耐藥相關(guān)蛋白1抗體包裝10MG
山橿根(標準品)英文名稱: Stearic acid多藥耐藥相關(guān)蛋白2抗體包裝50MG
山臘梅葉(標準品)英文名稱: Arctigenin多藥耐藥相關(guān)蛋白3抗體包裝100g
山蠟梅堿英文名稱: Arctiin線粒體核糖體蛋白L28抗體包裝25g
棒桿菌Corynebacterium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:純度≥98.0%抗表皮基底膜抗體試劑盒大葉茜草;Rubimaillin
鏈格孢Alternaria│sp. 質(zhì)量規(guī)格:≥850 μg/mg,BR抗斑疹傷寒抗體試劑盒大黃;Emodin
新城疫病毒Rubulavirus│Newcastle disease virus 質(zhì)量規(guī)格:標準品用于含量測定抗白色念珠菌試劑盒膽維他;Anethole trithio
GFP表達抑制劑(Ribocil)酯封端右旋聚乳(重均分子量1.5-3萬)Human, Mouse, Rat
酯封端右旋聚乳(重均分子量102-137萬)Human, Mouse
酯封端右旋聚乳(重均分子量137-170萬)Human
酯封端右旋聚乳(重均分子量17-26萬)Human, Mouse
酯封端右旋聚乳(重均分子量170-206萬)Human, Mouse, Rat
酯封端右旋聚乳(重均分子量206-288萬)Human, Mouse
酯封端右旋聚乳(重均分子量26-36萬)Human
酯封端右旋聚乳(重均分子量3-5.5萬)Human, Mouse, Rat
酯封端右旋聚乳(重均分子量36-48萬)Human, Mouse, Rat