多靶點(diǎn)激酶抑制劑(PP121)

多靶點(diǎn)激酶抑制劑(PP121)公司正在出售的產(chǎn)品：NHE1/RBITC 紅色羅丹明標(biāo)記鈉氫通道蛋白抗體IgG
RAMP-1/RBITC 紅色羅丹明標(biāo)記受體活性調(diào)制蛋白1抗體IgG
CD86/B7-2/RBITC 紅色羅丹明標(biāo)記CD86蛋白抗體抗體IgG
AT1R/RBITC 紅色羅丹明標(biāo)記血管緊張Ⅱ-1型受體抗體IgG
AT1R/AGTR1/FITC 熒光標(biāo)記血管緊張Ⅱ-1型受體抗體Ig

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
西藏木霉Bacillus sp.大鼠胰島(INS)

產(chǎn)氣莢膜梭菌 B型Brevibacillus sp.大鼠C肽(C-Peptide)

釀酒酵母Brevibacillus sp.大鼠C肽(C-Peptide)

叢毛單胞菌Brevibacillus sp.大鼠絨毛膜促性腺激(CG)

傳染性支氣管炎病Bacillus sp.大鼠絨毛膜促性腺激(CG)

銅綠假單胞菌/綠膿桿菌Bacillus sp.大鼠促黃體激(LH)

巨大芽孢桿菌Bacillus sp.大鼠促黃體激(LH)

空泡單胞菌Aneurinibacillus sp.大鼠抗心肌抗體(AMA)

草青霉Bacillus sp.大鼠抗心肌抗體(AMA)

葡萄座腔菌Bacillus sp.大鼠抗中性粒/中心體抗體(ACA)

腸膜明串珠菌Aneurinibacillus sp.大鼠抗中性粒/中心體抗體(ACA)

變紅青霉Aneurinibacillus sp.大鼠磷脂酰肌抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)

多形擬桿菌Aneurinibacillus sp.大鼠磷脂酰肌抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)

土地桿菌Aneurinibacillus sp.大鼠復(fù)合前列腺特異性抗原(CPSA)

馬來西亞鏈霉菌Aneurinibacillus sp.大鼠復(fù)合前列腺特異性抗原(CPSA)

緊密毛霉Aneurinibacillus sp.大鼠(trypsin)

BTRC2蛋白抗體黃色短波單胞菌大腸埃希氏菌DH5α/pNL4-3

瞬時受體電位離子通道蛋白1抗體M亞家族類產(chǎn)堿假單胞菌大腸埃希氏菌DH5α/pNL4-3 PR(-)

Toll樣受體8抗體黑座克雷伯氏菌淡紫灰鏈霉菌海南變種

動力蛋白輕鏈菠蘿泛菌稻谷枯菌
多靶點(diǎn)激酶抑制劑(PP121)香菇 異補(bǔ)骨脂

嗜果膠黃桿 補(bǔ)骨脂

戊糖乳桿 普通型透析袋（3500）

長枝木霉 木香烴內(nèi)酯

貝葉多孔 去氫木香內(nèi)酯

Bacillus atrophaeus 普通型透析袋（3500）

小孢根霉須狀變種 百秋李

枯草芽孢桿 β-胡蘿卜

玫瑰小雙孢 普通型透析袋（3500）

Bacillus 5-羥甲基糠

假密環(huán) 龍腦

枯草芽孢桿 普通型透析袋（7000）

地衣芽孢桿 千金子二萜

異常畢赤酵母 再生纖維透析袋（50000）

韓國紅球 續(xù)隨二萜