商品介紹:
β-Glycerol phosphate disodium salt pentahydrate是磷酸酶和張力蛋白同源物(PTEN)的抑制劑,來自US20110002877A1。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:13408-09-8 別名:β-Glycerophosphate disodium salt pentahydrate 純度:98.0% 分子量:308.13 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:PTEN抑制劑
英文名稱:β-Glycerol phosphate disodium salt pentahydrate
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1g|5g
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
小鼠組織金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP1)ELISA試劑盒 ,英文名: TIMP1 ELISA Kit
綿羊白介素2受體(IL-2R)ELISA檢測試劑盒SheepIerleukin-2receptor,IL-2RELISAkit 96T/48T
犬胰高血糖素樣肽1(GLP1)免疫試劑盒 Dog glucagon like peptide 1,GLP1 ELISA Kit
英文名稱MouseAdenosineiphosphataseELISAKit小鼠ATP酶規(guī)格:96T/48T
丙稀酰胺1公斤
RatFibrinogen,FbgELISA試劑盒大鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素3(IL-3)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-3 ELISA Kit
大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA檢測試劑盒Ratsolublereceptoractivatorofnuclearfactor-kBligand,sRANKLELISAKit 96T/48T
人T淋巴細胞白血病病毒Ⅰ/II(HTLV-Ⅰ/II)抗體免疫試劑盒 Human HTLV-Ⅰ/II aibody ELISA kit
英文名稱MouseNeuroophin-3,-3ELISAkit小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子-3(-3)規(guī)格:96T/48T
TEM電鏡石蠟切片免疫組織化學HRP酶聯(lián)DAB直接檢測試劑盒(含HRP一抗)10次
RabbitMacrophageInflammatoryProtein-1α,MIP-1αELISA試劑盒兔子巨噬細胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豬載脂蛋白B(Apo-B)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human sarcomeric - actinin alpha (SM Actinin- a) ELISA Kit 人橫紋肌輔肌動蛋白α (sm Actinin-α )ELISA試劑盒
Rabbitsolubleclusterofdiffereiation40ligand,sCD40LELISAKit 兔子可溶性白細胞分化抗原40配體(sCD40L)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
CLIAKitforApoA1(Humanai-apolipoproteinA1aibody)ELISAKit人抗載脂蛋白抗體A1規(guī)格:48T/96T
血清/血漿總膽汁酸酶循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20次
PorcineIestinalefoilfactor,ITFELISAKit豬腸三葉因子(ITF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
PTEN抑制劑SLC25A6 英文名稱: 線粒體載體腺嘌呤核苷酸轉(zhuǎn)運蛋白6抗體 0.2ml
ETFDH 英文名稱: 電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白脫氫酶抗體 0.2ml
CD68抗體(人、) Anti-CD68 0.1ml
Anti-VEGFR-3/FLt-4 /FITC 熒光素標記血管內(nèi)皮細胞生長因子受體-3IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-GATA-4(ser 262) 磷酸化GATA結合蛋白4抗體 規(guī)格 0.1ml
C-erbB-4/HER4/erbB-4 (epidermal growth factor receptor4) c-erbB-4癌基因抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg