產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Mcl1抑制劑(Mcl1-IN-2)
英文名稱:Mcl1-IN-2
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
Mcl1-IN-2是Mcl1抑制劑,沒(méi)有IC50活性值報(bào)道。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):292057-76-2 分子量:333.41 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠轉(zhuǎn)錄因子20(TCF20)ELISA試劑盒 ,英文名: TCF20 ELISA Kit
犬促黃體生成激素(LH)ELISA檢測(cè)試劑盒CanineLeinizingHormone,LHELISAKit 96T/48T
犬血管緊張素1-7(Ang1-7)免疫試劑盒 Dog angiotension 1-7,Ang1-7 ELISA kit
英文名稱HumaissuefactorpathwayinhibitorELISAKit人組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
超敏型ECL免疫印跡化學(xué)發(fā)光溶液A液:100毫升B液:500微升1000cm2
Ratglucocoicoidreceptor-β,GR-βELISA試劑盒大鼠糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素1受體拮抗劑(IL-1RA)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-1RA ELISA Kit
魚骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA檢測(cè)試劑盒FishOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISAkit 96T/48T
人11β羥類固醇脫氫酶1型(11β-HSD1)免疫試劑盒 Human 11β-HSD1 ELISA kit
英文名稱MouseCCL3ELISAKit小鼠CCL3規(guī)格:96T/48T
冰凍切片組織免疫化學(xué)固著溶液10毫升
Rateosinophilchemotacticfactor,ECFELISA試劑盒大鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豬細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human maix metalloproteinase 4 (MMP-4) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA試劑盒
Rabbitp53/tumorprotein,p53/TP53ELISAKit 兔p53(p53)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
CLIAKitforANP(MouseAialNaiureticPeptide)ELISAKit小鼠心鈉肽規(guī)格:48T/96T
血液半胱氨酸(cysteine)含量比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
Porcinegrowthhormone,GHELISAKit豬生長(zhǎng)激素(GH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Mcl1抑制劑(Mcl1-IN-2)SMMHC 英文名稱: 平滑肌肌球蛋白重鏈抗體 0.1ml
ET-1(2C4) 英文名稱: 內(nèi)皮素-1單克隆抗體 0.2ml
低分子量神經(jīng)絲蛋白抗體 Anti-NF-L 0.1ml
Anti-phospho-SHC (Ser36) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-p90RSK(Ser380) 磷酸化絲氨酸/蘇氨酸激酶p90RSK蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
Apaf-1 (Apoptosis protease activating factor-1)(CT) 凋亡蛋白活性因子-1(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)