mTORC1/2抑制劑(PQR620)

mTORC1/2抑制劑(PQR620)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-PR/FITC 熒光素標(biāo)記孕激素受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti-chicken IgM Whole serum 兔抗雞IgM抗血清Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml
胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-2抗體 Anti-IGFBP-2 0.2ml

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
小鼠轉(zhuǎn)錄激活因子6(ATF6)ELISA試劑盒 ，英文名： ATF6 ELISA Kit

犬β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA檢測(cè)試劑盒CanineBeta-Endorphin,β-EPELISAKit 96T/48T

犬胸腺肽α1(Thymosin α1)免疫試劑盒 Canine Thymosin α1 ELISA Kit

英文名稱HumaissuefactorELISAKit人組織因子(TF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

超敏型HRP-TMB底物顯色試劑盒10/50次

Ratglucocoicoid,GCELISA試劑盒大鼠內(nèi)源性糖皮質(zhì)激素(GC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒 ，英文名： IL1Ra ELISA Kit

大鼠凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA檢測(cè)試劑盒RatFactor-relatedApoptosis,FASELISAKit 96T/48T

人s腺苷同型半胱氨酸(SAH)免疫試劑盒 Human S-adenosylhomocysteine,SAH ELISA kit

英文名稱MouseHeatShockProtein20ELISAKit小鼠熱休克蛋白20(HSP20)規(guī)格：96T/48T

P高效液相色譜電化學(xué)定量檢測(cè)試劑盒20次

Rabbitniicoxide,NOELISA試劑盒兔一氧化氮(NO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

豬細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human maix metalloproteinase 5 (MMP-5) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA試劑盒

Rabbitai-braiissueaibody,ABAbELISAKit 兔抗腦組織抗體(ABAb)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝

CLIAKitforANP(HumanAialNaiureticPeptide)ELISAKit人心鈉肽規(guī)格：48T/96T

血液半胱氨酸(cysteine)含量高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20次

Porcinegrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin,GHRP-GhrelinELISAKit豬生長(zhǎng)激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
mTORC1/2抑制劑(PQR620)SCUBE1 英文名稱： 新型血小板相關(guān)血管內(nèi)皮分泌蛋白SCUBE1抗體 0.2ml

EV71 polyprotein VP1 英文名稱： 腸道病毒71型抗體 0.2ml

細(xì)胞核因子/k基因結(jié)合核因子抗體 Anti-NFKBp65 0.1ml

Anti-phospho-SHC (Tyr239/240)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-p95 NBS1(Ser343) 磷酸化滑膜細(xì)胞凋亡抑制物1抗體 規(guī)格 0.1ml

VTG(vitellogenin) 青鳉魚(yú)卵黃蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1mg