商品介紹:
MP-A08是一個高的選擇性的ATP競爭性的SK抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:219832-49-2 分子量:519.64 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:SK抑制劑(MP-A08)
英文名稱:MP-A08
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
小鼠轉(zhuǎn)錄激活因子5(ATF5)ELISA試劑盒 ,英文名: ATF5 ELISA Kit
犬雌二醇(E2)ELISA檢測試劑盒CanineEsadiol,E2ELISAKit 96T/48T
犬胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(TSLP)免疫試劑盒 Dog TSLP ELISA Kit
英文名稱Humaissue-typePlasminogenActivator(t-PA)ELISAkit人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
AP酶聯(lián)檢測封閉溶液10毫升
Ratglucoprotein130,gp130ELISA試劑盒大鼠糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素1受體拮抗劑(IL-1Ra)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human sialic acid (SA) ELISA Kit 人唾液酸(SA)ELISA試劑盒
HumaniactParathormone,i-PTHELISAKit 人全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
Humancardiacankyriepeatdomain1,ANKRD1ELISA試劑盒人心肌錨蛋白重復(fù)域1(ANKRD1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
重組腺病毒載體轉(zhuǎn)染試劑盒10次
HumanSolubleClusterofdiffereiation38,sCD38ELISAKit人可溶性CD38(sCD38)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豬戊型肝炎病毒IgG(HEV-IgG)ELISA試劑盒 48T/96T 試劑盒 組裝/原裝
Human maix metalloproteinase 7 (MMP-7) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA試劑盒
Rabbitleoopichormone,LHELISAKit 兔子促黃體激素(LH)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
CLIAKitforAnnexinA2humancELISAKit人膜粘連蛋白ⅡELISA試劑盒規(guī)格:48T/96T
血液丙二(MDA)比色法定量檢測試劑盒50次
PorcineGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRPELISAKit豬生長激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
SK抑制劑(MP-A08)Staufen 英文名稱: 雙鏈RNA結(jié)合蛋白Staufen抗體 0.2ml
E.coli O139 英文名稱: 抗志賀毒素大腸桿菌O139抗體(仔豬水腫病志賀毒素大腸桿菌O139) 0.2ml
高分子量神經(jīng)絲蛋白抗體 Anti-NF-H 0.1ml
Anti-SHC/FITC 熒光素標(biāo)記SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-p95/NBS1 (Ser343) 磷酸化DNA修復(fù)蛋白NBS1抗體 規(guī)格 0.1ml
ADM R, Adrenomedullin receptor 腎上腺髓質(zhì)素受體(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg