TLR4抑制劑(TAK-242)

TLR4抑制劑(TAK-242)公司*的產(chǎn)品：Anti-Phospho-MK1/2 (Ser217/221)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化原活化蛋白激酶激酶1/2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-TM/FITC 熒光素標(biāo)記血栓調(diào)節(jié)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：TLR4抑制劑(TAK-242)

英文名稱：TAK-242

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

野牡丹（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Nefopam HCl間質(zhì)衍化因子受體1抗體包裝100ml

野木瓜（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 17-Methyltestosterone神經(jīng)分化因子2抗體包裝25ml

野漆樹(shù)苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Bumetanide核孔復(fù)合體蛋白抗體包裝25g

葉黃; 二羥基-d-胡蘿卜(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Tranexamic acid神經(jīng)性因子ICP34.5（人單純皰疹?、裥停┛贵w包裝5g

葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Tranexamic acid背板膠質(zhì)乙酰酯抗體包裝100g

葉下珠（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Proglumide神經(jīng)PAS結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體包裝500g

夜香牛（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： GW501516(GSK-516; GW1516)神經(jīng)增殖和分化調(diào)控蛋白1抗體包裝10g

一點(diǎn)紅（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： IbuprofenNOTCH調(diào)節(jié)錨蛋白抗體包裝250g

一葉秋堿 ，一葉萩堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Bisacodyl神經(jīng)囊泡膜蛋白1抗體包裝50g

一枝黃花（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Chlorhexidine Acatate突觸生長(zhǎng)相關(guān)蛋白抗體包裝250ml

伊貝母(新疆貝母)（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： CyclopenthiazideNDUFA9蛋白抗體包裝50ml

乙酰丁香酚英文名稱： L-Methyldopa間變性淋巴瘤激核相互作用伴侶蛋白抗體包裝1g

乙酰杠柳寡糖C英文名稱： L-Methyldopa磷化間變性淋巴瘤激核相互作用伴侶蛋白抗體包裝5g

乙酰哈巴苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Mefenamic acid核仁和紡錘體相關(guān)蛋白1抗體包裝5g

乙?；邹继J(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Potassium iodide心臟特異性同源盒轉(zhuǎn)錄因子NKX2.5抗體包裝25g

發(fā)酵乳桿菌Lactobacillus fermentum 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR膠質(zhì)系來(lái)源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子試劑盒柴胡皂苷D;Saikosaponin D

灰葡萄孢Botrytis│cinerea 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR膠原吡啶交聯(lián)試劑盒柴胡皂苷C;Saikosaponin C

鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR降脂試劑盒柴胡皂苷A;Saikosaponin A
TLR4抑制劑(TAK-242)腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白4抗體正己乙酯 CAPROIC ACID ETHYLESTER(SG)Human, Mouse, Rat

結(jié)構(gòu)蛋白家族1抗體癸酯 CAPRIC ACID METHYLESTER(AS)Human

癌雌激誘導(dǎo)蛋白抗體癸酯 CAPRIC ACID METHYLESTER(AS)Human, Mouse

跨膜蛋白18抗體癸乙酯 CAPRIC ACID ETHYL ESTER(SG)Human

磷化雌激反應(yīng)指狀蛋白抗體癸乙酯 CAPRIC ACID ETHYL ESTER(SG)Human, Mouse, Rat

磷化神經(jīng)特異性微管蛋白抗體L-刀豆硫鹽 CANAVANINE SULFATE, L-(P)Human, Mouse

瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白7抗體（M亞家族）L-刀豆硫鹽 CANAVANINE SULFATE, L-(P)Human

“冷"蛋白TRPM8抗體L-刀豆硫鹽 CANAVANINE SULFATE, L-(P)Human, Mouse, Rat

瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白3抗體（M亞家族）反式角黃 CANTHAXANTHIN, trans-(SH)Human, Mouse, Rat