PI3Kα/β/δ/γ抑制劑(GSK1059615)

PI3Kα/β/δ/γ抑制劑(GSK1059615)公司*的產(chǎn)品：Anti-SIAH1/FITC 熒光素標(biāo)記泛素連接酶Siah1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti-rat IgM 兔抗大鼠IgM (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg
三磷酸鳥苷環(huán)水解酶抗體 Anti-GTP-CH-1 0.2m

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：PI3Kα/β/δ/γ抑制劑(GSK1059615)

英文名稱：GSK1059615

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

粗糙鏈孢霉*Alcanivorax dieselolei

棒狀乳桿菌棒狀亞種Microbacterium oxydans

硬結(jié)節(jié)桿菌Marinobacter hydrocarbonoclasticus

甜菜蛇眼病莖點(diǎn)霉Marinobacter hydrocarbonoclasticus

布氏假單胞菌Marinobacter hydrocarbonoclasticus

耐久腸球菌Marinobacter hydrocarbonoclasticus

棲河菌屬Bacillus barbaricus

多主葡萄殼菌Citricoccus alkalitolerans

楷米干酪菌Idiomarina seosinensis

黑木耳Idiomarina seosinensis

中慢生華癸根瘤菌Rhodococcus phenolicus

食砜節(jié)桿菌Halomonas venusta

戊糖乳桿菌Marinobacter hydrocarbonoclasticus

桃木腐層孔菌Halomonas venusta

實(shí)腐莖點(diǎn)霉Halomonas venusta

交鏈孢Halomonas alimentaria

豬早老1(PS-1)免疫試劑盒乙酰羧化抗體人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32) 白果雙黃

豬載脂蛋白E(Apo-E)免疫試劑盒磷化乙酰羧化抗體人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32) 白果

豬載脂蛋白B100(apo-B100)免疫試劑盒磷化Ack1抗體人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64) 白果新

豬載脂蛋白A5(apo-A5)免疫試劑盒磷化腺苷單磷活化蛋白激α1抗體人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64) 白花前胡
PI3Kα/β/δ/γ抑制劑(GSK1059615)SERINC3 英文名稱： 絲酸合并蛋白3抗體(差異表達(dá)蛋白) 0.2ml

Echidnotoxin 英文名稱： 蝮蛇蛇毒蛋白抗體 0.2ml

生長抑素受體1抗體 Anti-SSTR1 0.2ml

Anti-RALDH2/FITC 熒光素標(biāo)記視黃醛脫氫酶2型抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-MAP3K7IP1(Thr431) 磷酸化轉(zhuǎn)化生長因子β活化激酶結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml

Aurora B 極光激酶B抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg