p27降解抑制劑(Skp2 Inhibitor C1)

p27降解抑制劑(Skp2 Inhibitor C1)公司*的產(chǎn)品：CD99/E2 antigen/FITC 熒光標(biāo)記CD99抗體IgG
XAF1/FITC 熒光標(biāo)記XIAP相關(guān)因子1凋亡抑制蛋白抗體IgG
XBP-1/FITC 熒光標(biāo)記核轉(zhuǎn)錄因子X盒結(jié)合蛋白抗體IgG
MMP-2/RBITC 紅色羅丹明標(biāo)記質(zhì)金屬蛋白-2抗體IgG
XIAP/FITC 熒光標(biāo)記X-連鎖凋亡蛋白/性

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：p27降解抑制劑(Skp2 Inhibitor C1)

英文名稱：Skp2 Inhibitor C1

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

傘狀霉屬Aneurinibacillus sp.大鼠(trypsin)

叢毛單胞菌Aneurinibacillus sp.大鼠β干擾(IFN-β/IFNB)

糖化酵母Aneurinibacillus sp.大鼠β干擾(IFN-β/IFNB)

黃傘Aneurinibacillus sp.大鼠血小板因子3(PF-3)

胡椒枯萎病Aneurinibacillus sp.大鼠血小板因子3(PF-3)

易變?nèi)墙湍?/span>Bacillus sp.大鼠可溶性瘦受體(sLR)

巴氏醋桿菌羅旺亞種Bacillus sp.大鼠可溶性瘦受體(sLR)

孢淡灰鏈霉菌Bacillus sp.大鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)

多根硬皮馬勃Bacillus sp.大鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)

大孢硬皮馬勃Bacillus sp.大鼠艾杜糖硫酯(IDS)

釀酒酵母Bacillus sp.大鼠艾杜糖硫酯(IDS)

大腸埃希菌Bacillus sp.大鼠血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)

異常漢遜酵母Bacillus sp.大鼠血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)

孔狀短小莖點(diǎn)霉Bacillus sp.大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)

蠟狀芽孢桿菌Bacillus sp.大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)

巨型艾耳球蟲Bacillus sp.大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)

腫瘤壞死因子誘導(dǎo)蛋白8樣蛋白2/TNFα-IP8L2抗體產(chǎn)堿桿菌德干鏈霉菌

血小板生成受體抗體維氣單胞菌東方擬無枝菌

微管蛋白4α抗體希瓦菌冬蟲夏草屬

脫中胚蛋白抗體中華根瘤菌放線多孢菌屬菌種
p27降解抑制劑(Skp2 Inhibitor C1)根瘤 再生纖維透析袋（50000）

高溫放線 

灰褐雞油 再生纖維透析袋（50000）

枯草芽孢桿 石榴皮鞣

枯草芽孢桿 再生纖維透析袋（50000）

畢赤酵母屬 白楊

單增李斯特氏 再生纖維透析袋（25000）

少根根霉 再生纖維透析袋（8000）

大腸埃希 血平

小紅酵母 再生纖維透析袋（8000）

栗酒裂殖酵母 蘆竹堿

Enterobacter cowanii Inoue et al.  再生纖維透析袋（8000）

云芝 高三尖杉酯堿

熱黃鏈霉 化兩面針堿

澳型核果褐腐病 血根堿