公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:HIF-1抑制劑(KC7F2)
英文名稱:KC7F2
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
KC7F2是一種有效的HIF-1途徑抑制劑,可用作癌癥治療劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:927822-86-4 純度:99.38% 分子量:570.38 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
腐霉鋅指蛋白300(抗原)Anti-GMFB Antibody人相關(guān)蛋白A(CagA)
枯草芽胞桿菌鋅指脂蛋白-1a(抗原)Anti-GM-CSF(CSF2) Antibody人相關(guān)蛋白A(CagA)
曲霉屬鋅指脂蛋白-1b(抗原)Anti-GMFG Antibody人胃抑(GIP)
小單孢菌人鋅指脂蛋白-1c(抗原)Anti-GNA14 Antibody人胃抑(GIP)
真鲴希瓦氏菌干擾-γ多肽抗原(大、小鼠)Anti-GNAI3 Antibody人胃泌釋放多肽(GRP)
淡紫擬青霉干擾-β抗原Anti-GNA14 Antibody人胃泌釋放多肽(GRP)
竹瘤座菌干擾-β抗原Anti-GNAL Antibody人胃泌釋放肽前體(ProGRP)
冷杉粘褶菌前列腺干抗原Anti-GNAT1 Antibody人胃泌釋放肽前體(ProGRP)
壞損尾孢聚集蛋白抗原Anti-GNAT1 Antibody人膠原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)
泡盛曲霉三磷腺檸檬裂解Anti-GNAZ Antibody人膠原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)
紫芝脂肪增強(qiáng)結(jié)合蛋白1Anti-GNAT2 Antibody人促胰液/胰泌(Secretin)
枯草芽孢桿菌磷化腺苷單磷活化蛋白激α1Anti-GNB5 Antibody人促胰液/胰泌(Secretin)
鼠李糖乳桿菌腎上腺髓質(zhì)(1-52)Anti-GNE Antibody人多肽YY(Peptide-YY)
澳型核果褐腐病菌淀粉樣肽前體蛋白(多肽抗原)Anti-GNB5 Antibody人多肽YY(Peptide-YY)
土壤柔武氏菌促腎上腺皮質(zhì)激(1-39)Anti-GNE Antibody人促胃液受體(GsaR)
干酪乳桿菌脂聯(lián)(多肽抗原)Anti-GNL1 Antibody人促胃液受體(GsaR)
絲/蘇蛋白激SIK1抗體藤黃八疊球菌人惡性霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞
基底膜相關(guān)軟骨蛋白多糖抗體潮濕纖維單胞菌人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞(白介15基因修飾)
小細(xì)胞跨膜糖化蛋白抗體產(chǎn)黃纖維單胞菌高轉(zhuǎn)移潛能肝癌細(xì)胞
合胞1抗體黃色短桿菌人皮膚T淋巴瘤細(xì)胞
HIF-1抑制劑(KC7F2)根瘤 聚烯酸樹脂Ⅱ
高雄山蟲草 4-溴
假小鏈雙歧桿 乙酸鈰
大毛霉 2,4-二甲酸
大腸埃希氏 七氧化四鋱
香港橫梗霉 間羥基
絲蘭近藤氏酵母 環(huán)磷酰
釀酒酵母 乙酰氨基二酸二乙酯
黃萎輪枝孢* K-膠
費(fèi)希爾曲霉 I-膠
冬蟲夏草 膠
E.coli HT115(DE3) 苯佐
阿舒假囊酵母 硅藻土載體
海球 硅藻土
黃色革蘭氏 羊毛脂