PAK抑制劑(PF-3758309)

PAK抑制劑(PF-3758309)公司正在出售的產(chǎn)品：BJP(Human Bence-Jones protein) ELISA Kit 人本周蛋白聚二 average Mn 200
CEF(Human Carcinoembryonic Ferritin) ELISA Kit 人癌胚鐵蛋白聚二 average Mn 1000
SCCAg(Human squamous cell carcinom

以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

層出鐮孢原變種黑色瘤相關(guān)抗原B1抗體Human MTHFD1 ELISA Kit凝血因子Ⅱ(FⅡ)

立枯絲核菌微小染色體維持缺陷蛋白5抗體Human MTHFD2(Methylenetetrahydrofolate dehydrogenase 2) ELISA Kit凝血原肽段1+2(F1+2)

榆黃蘑結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白1抗體Human CDK5(Cyclin-dependent kinase 5) ELISA Kit凝血原前體蛋白(PIVKA-II)

深色殼囊孢基質(zhì)金屬蛋白-1抗體Human MTHFD1L ELISA Kit凝血原片段F1+2(F1+2)

蟬花磷化肌增強因子2C抗體Human MTHFS ELISA Kit凝血原(PT)

水生黃桿菌磷化肌增強因子2抗體Human MTHFD1L ELISA Kit凝血血栓調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物(T-TM)

皮生毛霉磷化髓鞘堿性蛋白抗體Human MTHFS ELISA Kit凝血受體(TR)

黑根霉磷化髓鞘堿性蛋白抗體Human MTHFD2(Methylenetetrahydrofolate dehydrogenase 2) ELISA Kit凝血敏感蛋白1(TSP-1)

芽殖球菌屬磷化肌球蛋白輕鏈6抗體Human OAS2(2′-5′-oligoadenylate synthase 2) ELISA Kit凝血抗凝血復(fù)合物(TAT)

孢小克銀漢霉輪生變種磷化p38MAPK抗體Human MRPL45 ELISA Kit凝血(TM)

枯草芽胞桿菌磷化p38MAPK抗體Human NPPC(C-type natriuretic peptide) ELISA Kit凝血(Thrombin)

乳乳球菌葉蟬亞種磷化肌增強因子2C抗體Human TTR(Transthyretin) ELISA Kit凝溶膠蛋白(GS)

釀酒酵母磷化基末端激2抗體Human DSG1(Desmoglein-1) ELISA Kit凝溶膠蛋白(Gelsolin)

雜硅鹽礦物節(jié)桿菌蛋白激MPK38抗體Human MS4A6A ELISA Kit凝聚(CLU)

彎孢菌微粒體S轉(zhuǎn)移1抗體Human MPV17L ELISA Kit凝膠原蛋白(gelson)

枯草芽孢桿菌粘蛋白13抗體Human MPV17 ELISA Kit尿腫瘤壞死因子相關(guān)誘導(dǎo)凋亡配體死亡受體4(TRAIL-DR4)

白地霉Geotrichum│candidum 質(zhì)量規(guī)格：≥98%,美國進口膽

單核細胞增生李斯特菌Listeria│monocytogenes 質(zhì)量規(guī)格：>99%龍膽苦苷

豬鏈球菌Streptococcus│suis 質(zhì)量規(guī)格：0.99植
PAK抑制劑(PF-3758309)金黃色葡萄球金黃亞種 2,3-二凝血因子ⅡElisa

真姬菇 2,4-二氟苯甲偽狂犬病病抗體Elisa

阿利坎特港富鹽 2-溴-4-氟苯甲III型前膠原Elisa

枯草芽胞桿 2-氨基嘌呤副流感病抗體Elisa

地衣芽胞桿（未復(fù)核可換ACCC06149） 2-氟肉桂酸酪氨酸羥化Elisa

放射形根瘤 2,2,3,3-四氟基烯酸酯酪氨酸羥化Elisa

棘殼孢屬 四基氫氧化銨弓形蟲病抗體Elisa

異常威克漢姆酵母 對六聯(lián)苯腺病抗體Elisa

大豆慢生根瘤 4-硫細小病Elisa

短短小芽胞桿 4-甲基-1-萘甲酸傳染性腹膜炎Elisa

埋藏曲霉 2-氟苯甲硬骨Elisa

金龜子綠僵(可訂） 5-氟-2-酚基質(zhì)金屬蛋白2Elisa

芽孢桿屬 3-氟-4-硝苯基質(zhì)金屬蛋白9Elisa

Frondihabitans 5-氟-2-硝苯骨成型蛋白2Elisa

枯草芽孢桿 4--2-氟膽紅Elisa