公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:小分子抑制劑(Sitravatinib)
英文名稱:Sitravatinib
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
Sitravatinib是一個(gè)新穎的小分子抑制劑,靶點(diǎn)是多個(gè)RTKs,IC50值是3980nmol/L。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1123837-84-2 別名:MGCD516;MG516 純度:98.64% 分子量:629.68 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
需鈉弧菌腎上腺能受體2抗原Anti-ARRDC3 Antibody白介17(IL17)
異常漢遜酵母促腎上腺皮質(zhì)激釋放因子Anti-ARRDC4 Antibody白介16(IL16)
枯草芽孢桿菌降鈣(抗原)Anti-ARSF Antibody白介15(IL15)
蠟狀芽孢桿菌降鈣受體(抗原)Anti-ARSE Antibody白介13(IL13)
米根霉鐵蛋白抗原Anti-ARSG Antibody白介12受體β2(IL2Rβ2)
小單孢菌色 C(抗原)Anti-ARSK Antibody白介12B(IL12B)
球毛殼腎上腺能受體β3Anti-ARSI Antibody白介12A(IL12A)
釀酒酵母巨化病(多肽)Anti-ARSK Antibody白介12(IL12)
豬鏈球菌多巴脫羧(抗原)Anti-ART1 Antibody白介11受體α(IL11Rα)
楊樹細(xì)盾霉(都不提供)人表皮生長因子受體-8(多肽片斷抗原)Anti-ART4 Antibody白介11(IL11)
Clostridium sp.α-L-阿拉伯呋喃糖苷抗原Anti-ASCL1 Antibody白介10受體α(IL10Rα)
雅致小克銀漢霉鱗狀癌抗原Anti-ASAP2 Antibody白介10(IL10)
污白干酪菌內(nèi)皮-1(多肽抗原)Anti-ASAP3 Antibody白喉合(DPH5)
毛霉?fàn)罹砻箖?nèi)皮-1(抗原)Anti-ARX Antibody巴特蛋白(BART)
大腸埃希氏菌內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Aβ相關(guān)結(jié)合蛋白(抗原)Anti-ASCL2 Antibody八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子4(OCT4)
松杉靈芝相關(guān)血漿蛋白AAnti-ASF1B Antibody八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子2(OCT2)
植烷酰羥化2相互作用蛋白抗體Sphingomonasjaponica小鼠T淋巴細(xì)胞
旁瘤抗原MA1抗體腸沙門氏菌腸炎亞種人支氣管上皮細(xì)胞
核糖核結(jié)合蛋白2抗體遲緩愛德華氏菌雞肝癌細(xì)胞
胰腺特異轉(zhuǎn)錄因子PTF1A抗體Massiliatieshanensis人肥大細(xì)胞
小分子抑制劑(Sitravatinib)冠突曲霉 Litseglutine B
稻生擲孢酵母 Lethedoside A
我孫子市鞘氨 Kushenol L
大腸埃希氏 Khayalenoid E
斜臥青霉 小構(gòu)樹 B
鉛黃腸球 Junipediol B
細(xì)鏈格孢 Isosalicifolin
鏈霉 Ilicol
大腸埃希氏(大腸桿)* Homaloside D
假單胞 Heteronoside
馬杜拉放線 Hancinone C
紅平菇 Hancinone C
酵母 Grandifloroside
雞傳染性支氣管炎病 Grandifloroside
谷氨酸棒桿 Gelomulide B