產(chǎn)品屬性:
中文名稱:PTB-1B抑制劑(MSI-1436 lactate)
英文名稱:MSI-1436 lactate
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
MSI-1436lactate是具有選擇性的PTB-1B的非競爭性抑制劑,其IC50值為1μM,而對TC-PTP的IC50值為224μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1309370-86-2 別名:Trodusquemine lactate;Aminosterol-1436 lactate 純度:95.0% 分子量:1000.17 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
香草(熔點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Milnacipran雙特異性磷2抗體包裝10MG
香蘭,香草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tetrabenazine21號染色體開放閱讀框106抗體包裝250mg
香葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tetrabenazine同源轉(zhuǎn)錄因子DLX5抗體包裝1g
消旋卡多曲(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: VigabatrinDVL3蛋白抗體包裝1g
消旋瑞格列奈(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: O-Desmethylvenlaine(DL)DNA依賴蛋白激催化亞基抗體包裝250mg
消旋山莨菪堿雜質(zhì)Ⅰ(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: FlumethasoneGADD153抗體包裝1g
消旋鹽替羅非班(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Flumethasone中間絲蛋白β-synemin抗體包裝250mg
硝地平雜質(zhì)ⅠI(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ritodrine HClMAP激激活死亡域蛋白4C抗體包裝1g
硝地平雜質(zhì)Ⅰ(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ritodrine HCl橋粒糖蛋白4抗體包裝1g
硝呋酚酰肼;硝呋奇特(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Indinavir sulfate動(dòng)力蛋白3抗體包裝5g
硝呋太爾(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tazobactam sodiumδ連環(huán)蛋白/δ連環(huán)/δ鏈接(δ-catenin)抗體包裝100ml
硝基呋喃烯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tazobactam sodium胞漿接頭蛋白Dok6抗體包裝1g
硝普鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: D-Cycloserine胞漿接頭蛋白Dok5抗體包裝25g
硝奧昔康唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: D-Cycloserine癌中心體相關(guān)蛋白抗體包裝5g
硝(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tetracycline hydrochlorideDCAF13蛋白抗體包裝1g
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品微管微絲交聯(lián)因子1試劑盒雙草鹽;4-Amino-4-Me
: CGMCC1.291資源名稱: 蠟狀芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格:>99%,EP6.8微管多特異性有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2試劑盒圣草酚;Eriodictyol
: 43224資源名稱: 堪薩斯分枝桿菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品微管多特異性有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1試劑盒α-三聯(lián)噻吩;α-Terthiophen
PTB-1B抑制劑(MSI-1436 lactate)小鼠絨毛膜促性腺激β鹽小檗(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
人腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子鹽藥根(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Rat
人色上皮衍生因子鹽伊立替康(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
小鼠性激結(jié)合球蛋白鹽益母草(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
人白介23鹽育亨賓(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
小鼠脫氫表雄S7羊膽粉(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
人克拉拉蛋白羊耳菊(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
大鼠心肌營養(yǎng)1羊開口(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
大鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA羊奶奶葉(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)