詳細介紹
商品介紹:
Diacetazotol抑制二惡英誘導的乙氧基烯丙醇-O-脫乙基酶(EROD)活性,IC50為75±4nM。Diacetazotol是文獻US20070032458中的化合物3。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:83-63-6 別名:Diacetotoluide 分子量:309.36 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
產品屬性:
英文名稱:Diacetazotol
產品規(guī)格:1mL(10mM)|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
乙酰黃芪皂苷I英文名稱: Azathioprine指(趾)關節(jié)粘連NOG蛋白抗體包裝5g
乙酰升麻-3-O-α-L-阿拉伯糖苷英文名稱: Artesunate核小體結合蛋白1抗體包裝100g
乙酰紫草英文名稱: Artesunate軸突蛋白1(Neurexin 1α)抗體包裝25g
乙酰紫堇靈(標準品)英文名稱: Sulpiride神經損傷誘導蛋白1抗體包裝5g
異阿魏(標準品)英文名稱: Salbutamol神經損傷誘導蛋白2抗體包裝1g
異貝殼杉烯英文名稱: Magnesium salicylate絲/蘇蛋白激Nek3抗體包裝5g
異補骨脂查爾;補骨脂乙(標準品)英文名稱: Stanozolol中心體相關蛋白激Nek2抗體包裝25g
異補骨脂二氫黃(標準品)英文名稱: Stanozolol神經顆粒抗體包裝5g
異補骨脂色烯查耳英文名稱: Phenytoin sodium神經肽S抗體包裝50mg
異補骨脂(標準品)英文名稱: Cinchonidine神經肽S抗體包裝1g
異橙黃英文名稱: Antazoline hydrochloride神經肽S受體1/G蛋白偶聯受體154抗體包裝5g
異丁香酚乙酯英文名稱: UlipristalG蛋白偶聯受體66/神經調節(jié)肽U受體1抗體包裝25g
異東莨菪內酯;異莨菪亭(標準品)英文名稱: Phenoxybenzamine hydrochlorideG蛋白偶聯受體FM4/神經調節(jié)肽U受體2抗體包裝5g
異莪術烯英文名稱: Clorprenaline hydrochloride神經肽S抗體包裝100g
異佛手柑內酯(標準品)英文名稱: BENORILATE腎上腺發(fā)育不全相關蛋白抗體包裝25g
果生鏈核盤菌Monilinia│fructigena Honey 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品降鈣原試劑盒次;Hypaconitine
米曲霉Aspergillus│oryzae 質量規(guī)格:>99%降鈣基因相關肽試劑盒蒼術;Atractylodin
產氣腸桿菌Enterobacter│aerogenes 質量規(guī)格:>98%降鈣試劑盒雌酚;Estrone
EROD抑制劑(Diacetazotol)腫瘤壞死因子受體相關因子2抗體葉綠 A CHLOROPHYLL A(SH)Human, Mouse, Rat
微管相關蛋白抗體葉綠銅鈉鹽 CHLOROPHYLLIN(RG)Human
Tar DNA 結合蛋白43抗體葉綠銅鈉鹽 CHLOROPHYLLIN(RG)Human
粘合(固生蛋白)抗體葉綠 A CHLOROPHYLL A, DIVINYL-(SH)Human, Mouse, Rat
三葉肽因子3抗體總葉綠 CHLOROPHYLL(RG)(PLEASE CALL)Human
組織因子途徑抑制劑-2抗體膽甾 CHOLESTENONE(RG)Human
轉移生長因子α抗體(TGFα)膽甾 CHOLESTENONE(RG)Human, Mouse
轉化生長因子β1抗體(TGFβ1)5-Α-膽甾烷-3- CHOLESTAN-3-ONE(RG)Human, Mouse, Rat
轉移生長因子β2抗體(TGFβ2)5-Α-膽甾烷-3- CHOLESTAN-3-ONE(RG)Human, Mouse