商品介紹:
Telbivudine是特異的HBV復(fù)制抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):3424-98-4 別名:Epavudine;L-Thymidine;NV 02B 純度:99.52% 分子量:242.23 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商陸皂苷T英文名稱(chēng): Esculin磷化肌球蛋白輕鏈抗體包裝5g
商陸皂苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Fraxetin肌肉特異性泛蛋白連接1抗體包裝1g
商陸皂苷辛英文名稱(chēng): 6,7-Dihydroxycoumarin泛蛋白連接抗體包裝25g
芍藥苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 6,7-Dihydroxycoumarin單羧轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體包裝5g
芍藥內(nèi)酯苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Solanesol可溶性蘋(píng)果脫氫抗體包裝1g
蛇床子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Hesperitin蛋白激C亞性D型抗體包裝1g
蛇床子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Qingyangshengenin A磷化µ-型阿片受體抗體包裝5g
蛇膽汁(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Qingyangshengenin B磷化絲裂原活化蛋白激激1/2抗體包裝1g
射干(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 4'-Demethylepipodophyllotoxin基質(zhì)金屬蛋白9抗體包裝250mg
麝香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Demethoxycurcumin染色體及有絲分裂蛋白MIS12抗體包裝1g
伸筋草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Norisoboldine單羧轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體包裝25g
腎茶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Dehydrodiisoeugenol線粒體核糖體蛋白L11抗體包裝5g
升麻(興安升麻)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Corynoxeine促血管平滑肌分化因子抗體包裝1g
升麻-3-O-β-D-吡喃木糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Dehydrocostus Lactone跨膜結(jié)構(gòu)域4亞家族成員2抗體包裝250mg
升麻-4'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷英文名稱(chēng): Genistin磷化致癌基因C-Myc抗體包裝5g
黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:培養(yǎng)級(jí),效價(jià)≥180IU/mg抗U1小核核糖核蛋白70kDa試劑盒對(duì)葉百部堿;Tuberostemonin
黃土根瘤菌Rhizobium│plateaum 質(zhì)量規(guī)格:BR,>98%,藥用級(jí)抗TNF-α自身抗體ELISA Kit東莨菪內(nèi)酯;Scopoletin
青霉屬Penicillium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,CP抗SS-B/La抗體ELISA Kit丁香;Syringic acid
HBV復(fù)制抑制劑(Telbivudine)質(zhì)分裂付出蛋白1抗體鹽格拉司瓊(標(biāo)準(zhǔn)品) Solamargine
腦表皮生長(zhǎng)因子跨膜蛋白DNER抗體鹽關(guān)附(標(biāo)準(zhǔn)品) Solasonine
DUX3蛋白抗體鹽環(huán)沙星(標(biāo)準(zhǔn)品) Angoroside C
死亡相關(guān)蛋白1抗體鹽環(huán)侖特羅(標(biāo)準(zhǔn)品) Toremifene
軸絲動(dòng)力蛋白重鏈9抗體鹽黃酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Toremifene
磷化動(dòng)力相關(guān)蛋白1抗體鹽噻/泊酚雜質(zhì)J(標(biāo)準(zhǔn)品) Neratinib(HKI-272)
DNA連接4抗體鹽芬酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Methyl Protodioscin
二肽肽6抗體鹽氧那明(標(biāo)準(zhǔn)品) Gracillin
二氫葉還原抗體鹽金剛烷(標(biāo)準(zhǔn)品) Yohimbine HCl