商品介紹:
SFLLRNPNDKYEPF是人工合成的thrombin受體激動(dòng)劑肽段。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):137339-65-2 別名:Ser-Phe-Leu-Leu-Arg-Asn-Pro-Asn-Asp-Lys-Tyr-Glu-Pro-Phe;SFLLRNPNDKYEPF 分子量:1739.92 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:thrombin受體激動(dòng)劑(Sfllrnpndkyepf)
英文名稱:Sfllrnpndkyepf
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
八角楓(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Strontium chloride, hexhydrate磷化埃茲蛋白抗體包裝100mg
八角茴香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Calcium sulfate, dihydrate嗜性粒陽(yáng)離子蛋白抗體包裝100mg
八角蓮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: dCMP, 2'-Deoxycytidine 5'-monophosphate, free acidE1A樣分化抑制因子3抗體包裝25mg
八角麻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DSS骨骼肌烯化抗體包裝1g
巴豆(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Adenosine deaminase from calf spleen 15U/mg真核翻譯起始因子2C1抗體包裝25g
巴豆苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Alloxan, monohydrate磷化eIF4E結(jié)合蛋白抗體包裝5g
巴戟天(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ammonium citrate, dibasic附睪蛋白抑制蛋白包裝1g
巴利森苷A;派立辛(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Calcium (L)-lactate, pentahydrate內(nèi)皮B受體抗體包裝5g
巴西蘇木(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: dTMP, 2'-Deoxythymidine-5'-monophosphate disodium salt大腸桿菌脂多糖抗體包裝1g
芭蕉根(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DulcitolGLP1類似蛋白Exendin4抗體包裝5g
菝葜皂苷元,知母皂苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Melezitose hydrate磷化真核翻譯起始因子4B抗體包裝100g
白當(dāng)歸腦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: PEG 20000上皮癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體包裝25g
白當(dāng)歸(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2-Aminothiazole磷化轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體包裝500g
白附子(獨(dú)角蓮)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cerium (III) chloride, heptahydrate磷化轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體包裝1g
白果(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: D(+)-Arabitol磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體包裝1g
擬諾卡氏菌Nocardiopsis│sp. 質(zhì)量規(guī)格:干品Purity≥98.0%絲/蘇激24試劑盒人參皂苷Rh3;ginsenoside
米舒青霉Penicillium│miczynskii 質(zhì)量規(guī)格:>65IU/MG,BR絲/蘇蛋白磷試劑盒人參皂苷Rh2;Ginsenoside
: K73/39資源名稱: 巴拿馬沙門(mén)氏菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP31絲/蘇蛋白激PAK4試劑盒人參皂苷Rh1;Ginsenoside
thrombin受體激動(dòng)劑(Sfllrnpndkyepf)新型金屬質(zhì)蛋白(抗原)月桂(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
脂聯(lián)受體-1(抗原)孕三烯(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
脂聯(lián)受體-2(抗原)扎來(lái)普(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
前列腺性磷抗原扎那米韋(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
前列腺性磷抗原(人)扎托布洛芬(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
P選擇抗原正己(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
溶體膜糖蛋白抗原正十九烷(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
一種腫瘤抑制因抗原(C端)正十五烷(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
微白蛋白/細(xì)小清蛋白抗原芝麻酚(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse