商品介紹:
NS-018是一種新型高度選擇性的JAK2抑制劑,NS-018抑制Ba/F3-JAK2V617F細(xì)胞生長,IC50值為470nM,而抑制IL-3刺激的Ba/F3-JAK2WT細(xì)胞生長,IC50值為2000nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1239358-86-1 分子量:389.43 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:JAK2抑制劑(NS-018)
英文名稱:NS-018
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
聚集蛋白聚糖(AGC)ELISA Kit英文名稱:AGC ELISA Kit磷化原癌基因c-Jun抗體包裝5g
巨噬細(xì)胞炎性蛋白相關(guān)蛋白1(MRP1)ELISA Kit英文名稱:MRP1 ELISA Kit磷化原癌基因c-Jun抗體包裝25g
巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP3β)ELISA Kit英文名稱:MIP3β ELISA Kit1號染色體開放閱讀框86抗體包裝5g
巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP3α)ELISA Kit英文名稱:MIP3α ELISA Kit8號染色體開放閱讀框59抗體包裝10MG
巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP1β)ELISA Kit英文名稱:MIP1β ELISA Kit磷化補(bǔ)體成分5受體1抗體包裝1g
巨噬細(xì)胞來源趨化因子(MDC)ELISA Kit英文名稱:MDC ELISA Kit補(bǔ)體C6抗體包裝1g
巨噬細(xì)胞集落刺激因子(MCSF)ELISA Kit英文名稱:MCSF ELISA Kit癌胚抗原相關(guān)粘附分子7抗體包裝1g
靜止Q6硫基氧化1(QSOX1)ELISA Kit英文名稱:QSOX1 ELISA Kit磷化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP β抗體包裝1g
精胺氧化(SMOX)ELISA Kit英文名稱:SMOX ELISA Kit磷化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP β抗體包裝1g
精(Arg)ELISA Kit英文名稱:Arg ELISA Kit轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBPδ抗體包裝1g
精加壓原(VP)ELISA Kit英文名稱:VP ELISA Kit轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBPε抗體包裝5g
精加壓受體1B(AVPR1B)ELISA Kit英文名稱:AVPR1B ELISA Kit磷化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBPε抗體包裝1ml
精/絲豐富剪接因子4(SRSF4)ELISA Kit英文名稱:SRSF4 ELISA Kit腦血管內(nèi)皮粘附分子1抗體包裝5ml
晶狀體蛋白αB(CRYαB)ELISA Kit英文名稱:CRYαB ELISA Kit補(bǔ)體C1QL4鏈多肽抗體包裝1g
金屬硫蛋白1(MT1)ELISA Kit英文名稱:MT1 ELISA Kit19號染色體開放閱讀框2抗體包裝5g
蠟狀芽孢桿菌Bacillus│cereus 質(zhì)量規(guī)格:含量≥700IU/mg,BR脂聯(lián)受體1試劑盒獐牙菜苦苷;Swertiamarine
巴氏醋桿菌Acetobacter│pasteurianus 質(zhì)量規(guī)格:效價測定脂聯(lián)試劑盒芝麻;Sesamin
: =ATCC56023資源名稱: 戴爾根霉 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP,BR脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白5試劑盒2-乙?;蠖∠惴榆?2-Acetyla
JAK2抑制劑(NS-018)同源盒蛋白C6抗體鹽藥根(標(biāo)準(zhǔn)品) L-Lysine methyl ester dihydrochloride
同源盒蛋白C4抗體鹽伊立替康(標(biāo)準(zhǔn)品) L-Methionine Methyl Ester Hydrochloride
同源盒蛋白D13抗體鹽益母草(標(biāo)準(zhǔn)品) Sodium cholesteryl sulfate
組蛋白H1.4樣蛋白抗體鹽育亨賓(標(biāo)準(zhǔn)品) O-tert-Butyl-L-serine methyl ester hydrochloride
組蛋白H1FOO抗體羊膽粉(標(biāo)準(zhǔn)品) L-Valine methyl ester hydrochloride
同源盒蛋白B6抗體羊耳菊(標(biāo)準(zhǔn)品) L-Valinamide hydrochloride
錯構(gòu)蛋白抗體羊開口(標(biāo)準(zhǔn)品) Cysteamine Hydrochloride
磷化組蛋白H1FOO抗體羊奶奶葉(標(biāo)準(zhǔn)品) Glycinamide hydrochloride
單純皰疹病1型轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子ICP22抗體楊梅苷(標(biāo)準(zhǔn)品) L-4-Hydroxyproline methyl ester hydrochloride