醛糖還原酶抑制劑（Alrestatin）

醛糖還原酶抑制劑（Alrestatin）公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-Phospho-MKK7 (Ser271/Thr275) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化原活化蛋白激酶MKK7抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-TRAF6 /FITC 熒光素標(biāo)記壞死因子受體相關(guān)因子6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhes

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
硝硫（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Tetracycline hydrochloride原鈣粘蛋白16抗體包裝250mg

硝硫康唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Carbenicillin disodium雌激受體相關(guān)蛋白α抗體包裝100g

硝咪康唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Carbenicillin disodiumDPY19L2蛋白抗體包裝25g

硝舍他康唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Fenbendazole二氫嘧啶脫氫抗體包裝25g

硝異康唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Fenbendazole短粗矮胖19蛋白樣1抗體包裝5g

硝異山梨酯（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： D-Cloprostenol sodiumDPY19L4蛋白抗體包裝1g

硝益康唑（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： DL-Cloprostenol sodium二肽基肽9抗體包裝250mg

硝唑尼特(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Ligustrazine HCl二肽基肽8抗體包裝25g

小諾霉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ligustrazine HCl多巴受體D4抗體包裝5g

纈沙坦（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： CephalexinDQX1蛋白抗體包裝1g

纈沙坦對(duì)映異構(gòu)體（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Cephalexin三磷腺苷依賴解旋ddx5抗體包裝5g

辛伐他汀,辛伐他?。?biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Gibberellic acid(GA3 )磷化三磷腺苷依賴解旋ddx5抗體包裝25g

辛可尼?。?biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Chloramphenicol閱讀障礙相關(guān)蛋白DLX2抗體包裝5g

(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Chloramphenicol肌營(yíng)養(yǎng)蛋白α抗體包裝100g

新霉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： ChloramphenicolCD299抗體包裝25g

接骨木鐮孢Fusarium│sambucinum 質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR微管蛋白,γ復(fù)合體關(guān)聯(lián)蛋白3試劑盒雙去氧基姜黃;DideMethoxy

地芽孢桿菌（加詞待譯）Geobacillus│galactosidasius 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品網(wǎng)膜試劑盒桑皮苷C;Mulberroside C

芽胞桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：進(jìn)分Sigma V1377晚期氧化蛋白產(chǎn)物試劑盒桑辛;Morusin
醛糖還原酶抑制劑（Alrestatin）小鼠溶菌龍膽（堅(jiān)龍膽）（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

小鼠甘油三酯龍膽（龍膽）（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse

人含纈酪肽蛋白龍膽花（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

人可溶性CD28龍膽苦苷（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse

兔載脂蛋白B100龍膽；2,5-二羥(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse

植物維生K1龍脷葉（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse

大鼠低密度脂蛋白龍腦（標(biāo)準(zhǔn)品）Human

小鼠β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白植提標(biāo)準(zhǔn)品Human

小鼠垂體腺苷環(huán)化激活肽龍血竭（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat