詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Niclosamide | 5g|10g | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
Niclosamide是一種STAT抑制劑,IC50值為0.7μM,可以抑制DNA復制。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:50-65-7 別名:BAY2353 純度:98.88% 分子量:327.12 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
芹菜苷; 芹黃苷(標準品)英文名稱: N-Methyl-N-TMS-acetamide調節(jié)蛋白GAL4抗體包裝25g
芹菜(標準品)英文名稱: N-Trimethylsilylimidazole配子生成結合蛋白1抗體包裝50mg
芹菜-6-C-α-L-吡喃阿拉伯糖-8-C-β-D-...英文名稱: N-Trimethylsilylacetamide鋅指蛋白403/喉癌相關蛋白1抗體包裝1g
芹菜-7-O-(2G-鼠李糖)龍膽糖苷英文名稱: 1,1,3,3-Tetramethyldisilazane鳥苷環(huán)化α2/GCS-α-2抗體包裝5g
芹菜-7-O-葡萄糖苷英文名稱: 1-(tert-Butyldimethylsilyl)imidazoleG蛋白偶聯(lián)受體7抗體包裝1g
秦皮(標準品)英文名稱: N,O-Bis(tert-butyldimethylsilyl)acetamide 糖基磷脂酰肌錨連接蛋白1抗體包裝250mg
秦皮苷(標準品)英文名稱: 1-(Dimethylisopropylsilyl)imidazole3-磷甘油?;D移2抗體包裝5g
秦皮(標準品)英文名稱: 1,3-Bis(chloromethyl)tetramethyldisilazaneG蛋白修補結構域蛋白4抗體包裝100g
秦皮(標準品)英文名稱: Tetramethyl-1,3-diphenyldisilazane富含GC啟動子結合蛋白1/血管壁相連蛋白抗體包裝25g
秦皮乙(標準品)英文名稱: N-Methyl-N-nitrosourethane血管壁相連蛋白樣蛋白1抗體包裝5g
青黛(標準品)英文名稱: N-AcetylimidazoleG蛋白偶聯(lián)受體151抗體包裝100g
青風藤(標準品)英文名稱: 1-(Heptafluorobutyryl)imidazole G蛋白偶聯(lián)受體77抗體包裝25g
青果(標準品)英文名稱: Pentafluorobenzyl Bromide精神發(fā)育遲滯相關蛋白Rab GDI α抗體包裝5g
青蒿(標準品)英文名稱: O-(2,3,4,5,6-Pentafluorobenzyl)hydroxylamine Hydrochloride甘油磷二酯磷結構域4抗體包裝100g
青蒿琥酯(標準品)英文名稱: NonaneD-果糖6磷轉移2抗體包裝25g
蘇云金芽胞桿菌Bacillus│thuringiensis 質量規(guī)格:>98%,USP凝血原前體蛋白試劑盒木犀草;Luteolin
巴氏醋桿菌Acetobacter│pasteurianus 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品凝血原片段F1+2試劑盒麥冬皂苷D;Ophiopogonin D
黑曲霉Aspergillus│niger 質量規(guī)格:>98%凝血血栓調節(jié)蛋白復合物試劑盒2"-O-沒食子?;鸾z桃苷;2"-O-
STAT抑制劑(Niclosamide)氧氣調節(jié)蛋白150抗體酯封端左旋聚乳(重均分子量206-288萬) Hydrazine sulfate
氧化應激反應蛋白1抗體酯封端左旋聚乳(重均分子量26-36萬) Cyclandelate
固生蛋白M抗體酯封端左旋聚乳(重均分子量3-5.5萬) Nitrilotriacetic acid
末端多聚腺苷1蛋白抗體酯封端左旋聚乳(重均分子量36-48萬) 1,3- Propylene Glycol
嗅球蛋白3抗體酯封端左旋聚乳(重均分子量48-73萬) Diethylene Glycol
轉錄因子OTX1抗體酯封端左旋聚乳(重均分子量5.5-9 萬) Chlorothiazide
轉錄因子OTX2抗體酯封端左旋聚乳(重均分子量73-102萬) 4-amino-6-chloro-1,3-benzenedisulfonamide
轉錄因子OTX1+OTX2抗體酯封端左旋聚乳(重均分子量9-17萬) Alkene
增食欲B/欲激B(3R,4R)-N,4-二-1-()-3-... N-Methylparoxetine