K-ras抑制劑(K-Ras-IN-1)

K-ras抑制劑(K-Ras-IN-1)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-NKA/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)激肽A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-WNK1/FITC 熒光素標(biāo)記賴氨酸缺陷型蛋白激酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
堿性成纖維細(xì)胞生長因子抗體 Anti-BFGF/FGF-2 0.1ml
Goat

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

小鼠轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族M成員4(PM4)ELISA試劑盒 ，英文名： PM4 ELISA Kit

犬血栓前體蛋白(TpP)ELISA檢測試劑盒Caninethrombusprecursorprotein,TpPELISAKit 96T/48T

犬纖溶酶原激活物抑制劑1(SERPINE1)免疫試劑盒 Dog plasminogen activator inhibitor 1,SERPINE1 ELISA kit

英文名稱humanHistamineELISAKIT人組胺(Histamine)規(guī)格：96T/48T

超氧化物歧化酶(SOD)標(biāo)準(zhǔn)曲線測定試劑盒5次

RatGlycogenphosphorylaseII,GP-IIELISA試劑盒大鼠糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-1sRⅡ ELISA Kit

大鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長因子(SCF/MGF)ELISA檢測試劑盒RatStemcellfactor/mastcellgrowthfactor,SCF/MGFELISAkit 96T/48T

人Syndecan-3/(SDC3)免疫試劑盒 Human SDC3 ELISA Kit

英文名稱MouseALDELISAKit小鼠固同(ALD)規(guī)格：96T/48T

ypanosomacongolenseRFLP基因分析試劑盒20次

RabbitNoradrenaline,NAELISA試劑盒兔去甲腎上腺素(NA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

豬髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human tissue inhibitors of metalloproteinase 3 (TIMP-3) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA試劑盒

GuineaPigplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISAKit 豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝

CLIAKitforANGPTL3(Humanangiopoietin-likeprotein3)ELISAKit人血管生成素樣蛋白3規(guī)格：48T/96T

血液超氧化物陰離子熒光法定量檢測試劑盒20次

PorcineFibrinogen,FbgELISAKit豬血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
K-ras抑制劑(K-Ras-IN-1)Phospho-5-Lipoxygenase(Ser271) 英文名稱： 磷酸化5-脂氧合酶抗體 0.1ml

Phospho-EEF2k (Ser366) 英文名稱： 磷酸化真核延伸因子激酶2抗體 0.1ml

蛋白抗體 Anti-Nephrin Protein 0.1ml

Anti-Shadow/SPRN/FITC 熒光素標(biāo)記新朊蛋白/朊蛋白相關(guān)蛋白/沙杜(Shadoo)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-PAK1/2/3(Thr423) 磷酸化p21激活激酶1/2/3抗體 規(guī)格 0.1ml

5-HT(5-Hydroxy-L-tryptophan/L-5-HTP) 5-羥色胺Multi-class antibodies規(guī)格： 50mg