商品介紹:
Tadalafil是PDE5抑制劑,IC50為1.8nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):171596-29-5 純度:99.93% 分子量:389.4 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
激活蛋白C(APC)ELISA Kit英文名稱:APC ELISA Kit9號(hào)染色體開放閱讀框139抗體包裝1g
激活T-細(xì)胞核因子1(NFATC1)ELISA Kit英文名稱:NFATC1 ELISA Kit9號(hào)染色體開放閱讀框140抗體包裝5g
基質(zhì)細(xì)胞衍生因子4(SDF4)ELISA Kit英文名稱:SDF4 ELISA Kit9號(hào)染色體開放閱讀框142抗體包裝1g
基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1(SDF1)ELISA Kit英文名稱:SDF1 ELISA Kit9號(hào)染色體開放閱讀框163抗體包裝5g
基質(zhì)金屬蛋白9(MMP9)ELISA Kit英文名稱:MMP9 ELISA Kit9號(hào)染色體開放閱讀框169抗體包裝25g
基質(zhì)金屬蛋白8(MMP8)ELISA Kit英文名稱:MMP8 ELISA Kit9號(hào)染色體開放閱讀框173抗體包裝5g
基質(zhì)金屬蛋白7(MMP7)ELISA Kit英文名稱:MMP7 ELISA Kit9號(hào)染色體開放閱讀框21抗體包裝100g
基質(zhì)金屬蛋白3(MMP3)ELISA Kit英文名稱:MMP3 ELISA Kit磷化絲/蘇蛋白激II β/casein kinase IIβ抗體包裝25g
基質(zhì)金屬蛋白23B(MMP23B)ELISA Kit英文名稱:MMP23B ELISA Kit癌胚抗原抗體包裝100g
基質(zhì)金屬蛋白2(MMP2)ELISA Kit英文名稱:MMP2 ELISA Kit癌胚抗原抗體包裝25g
基質(zhì)金屬蛋白19(MMP19)ELISA Kit英文名稱:MMP19 ELISA Kit粘附分子相關(guān)蛋白/癌基因下調(diào)蛋白抗體包裝500g
基質(zhì)金屬蛋白15(MMP15)ELISA Kit英文名稱:MMP15 ELISA Kit淋巴抗原Ly6c抗體包裝25g
基質(zhì)金屬蛋白14(MMP14)ELISA Kit英文名稱:MMP14 ELISA Kit周期E抗體包裝5g
基質(zhì)金屬蛋白13(MMP13)ELISA Kit英文名稱:MMP13 ELISA Kit7號(hào)染色體開放閱讀框50抗體包裝25g
基質(zhì)金屬蛋白12(MMP12)ELISA Kit英文名稱:MMP12 ELISA Kit7號(hào)染色體開放閱讀框53抗體包裝5g
: =JCM3025=CBS429.61=DSM43023=IFM1175=IFO13資源名稱: 白色鏈孢囊菌 質(zhì)量規(guī)格:>95%,EP,BR脂阿拉伯甘露聚糖試劑盒銀杏雙黃;ginkgetin
雅致小克銀漢霉Cunninghamella│elegans 質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測(cè)定整合連接激1試劑盒楊芽黃;Tectochrysin
葡萄座腔菌屬Botryosphaeria│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP34整合β4結(jié)合蛋白試劑盒魚藤;deguelin
PDE5抑制劑(Tadalafil)同源結(jié)構(gòu)蛋白1抗體木蝴蝶苷A(標(biāo)準(zhǔn)品) Aurantio-obtusin
增殖誘導(dǎo)蛋白5/肺癌相關(guān)蛋白10抗體木蝴蝶苷B(標(biāo)準(zhǔn)品) Hesperidin
肌鈀蛋白抗體木蘭花(標(biāo)準(zhǔn)品) Hesperidin
肌管相關(guān)蛋白2抗體木蘭花(標(biāo)準(zhǔn)品) Hesperitin
質(zhì)金屬蛋白18/19抗體木蘭脂(標(biāo)準(zhǔn)品) Cordycepin
增殖相關(guān)蛋白MAGOH抗體木棉花(標(biāo)準(zhǔn)品) Nobiletin
絲裂原活化蛋白激激激4抗體木栓(標(biāo)準(zhǔn)品) Nobiletin
神經(jīng)分化因子6抗體木通乙苷B;荷苞花苷B Toosendanin
同源盒蛋白Meis2抗體木犀草苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Tetramethylpyrazine