產(chǎn)品屬性:
中文名稱:PI3K抑制劑(SF2523)
英文名稱:SF2523
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
SF2523是一種有效的選擇性PI3K抑制劑,抑制PI3Kα,PI3Kγ,DNA-PK,BRD4和mTOR,IC50分別為34nM,158nM,9nM,241nM和280nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1174428-47-7 純度:99.37% 分子量:371.41 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
枯草芽孢桿菌Bacillus thuringiensis雞乙酰乙檢測(cè)(ACAC)
聚生殼菌Bacillus thuringiensis雞傳染性鼻炎抗體(IC)
星孢鏈霉菌Bacillus thuringiensis雞傳染性鼻炎抗體(IC)
紅色鹽顆粒形菌Bacillus thuringiensis雞透明質(zhì)(HA)
血紅栓菌Bacillus thuringiensis雞透明質(zhì)(HA)
pG+HOST9(pVE6155)Bacillus thuringiensis雞硫類肝(HS)
英國蘑菇Bacillus thuringiensis雞硫類肝(HS)
粗皮側(cè)耳(平菇)Bacillus thuringiensis雞催乳(PRL)
黃海鞘盒菌Bacillus thuringiensis雞催乳(PRL)
基恩帚枝霉Bacillus thuringiensis雞白血病病抗原(ALV-AG)
釀酒酵母Bacillus thuringiensis雞白血病病抗原(ALV-AG)
淡青鏈霉菌Bacillus thuringiensis雞促卵泡(FSH)
黑曲霉Bacillus thuringiensis雞促卵泡(FSH)
馬杜放線菌Bacillus thuringiensis雞促黃體激(LH)
枯草芽孢桿菌Bacillus thuringiensis雞促黃體激(LH)
松口蘑Bacillus thuringiensis雞γ干擾(IFN-γ)
絲裂原活化蛋白激激4抗體慢生根瘤菌(豇豆族)牛瘟病毒
膽固調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1抗體百脈根中慢生根瘤菌兔出血癥病毒
抑基因SNF2β抗體紫穗槐中慢生根瘤菌單核細(xì)胞增生李斯特菌
泛樣修飾體-1抗體地中海中慢生根瘤菌DH5α大腸桿菌克菌株
PI3K抑制劑(SF2523)SENP1 英文名稱: 小泛素相關(guān)修飾蛋白1抗體 0.2ml
Exendin 4 英文名稱: GLP1類似蛋白Exendin4抗體 0.1ml
P63 抑制基因抗體 Anti-P63 protein 0.1ml
Anti-SPAG5/map126 /FITC 熒光素標(biāo)記抗相關(guān)抗原5抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-NFKB2(Ser866+Ser870) 細(xì)胞核因子/k基因結(jié)合核因子p100抗體 規(guī)格 0.1ml
Alpha-AF/ Alpha-Afa(alpha-L-arabinofuranosidase) α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)