WNT抑制劑(CCT251545)

WNT抑制劑(CCT251545)公司正在出售的產(chǎn)品：Human TU3A Protein ELISA Kit 人TU3A蛋白鈦異酯 99.999% metals basis
Human electron-transfer-flavoprotein beta polypeptide,ETFB ELISA Kit 人電子轉(zhuǎn)移黃蛋白β肽六氟 60%水溶液
Human dermato-pontin,

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

光帽鱗傘絲/蘇蛋白激17A/DAP凋亡誘導(dǎo)蛋白激1抗體Anti-GRB14 Antibody周期D1(CCND1)

里亞氏須腹菌碳?xì)溻c協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A7抗體Anti-GRB2 Antibody周期C(CCNC)

蠟狀芽孢桿菌微管卷曲蛋白SYNC抗體Anti-GRB10 Antibody周期B3(CCNB3)

角微菌磷化SH2結(jié)構(gòu)含磷肌SHIP1抗體Anti-GRB7 Antibody周期B2(CCNB2)

腐皮鐮孢菌磷化沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體Anti-GRB7 Antibody周期B(CCNB)

長(zhǎng)枝木霉線粒體促凋亡蛋白抗體Anti-GREM1 Antibody周期A1(CCNA1)

鏈球菌(不定種)墨蝶蛉還原抗體Anti-GREM1 Antibody周期A(CCNA)

北方蜜環(huán)菌核突觸蛋白α+β抗體Anti-GRIA1 Antibody粘附分子1(CADM1)

枯草芽孢桿菌內(nèi)質(zhì)網(wǎng)脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)蛋白2抗體Anti-GRIA1 Antibody(PB0201)因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子3(SOCS3)

糙孢籃狀菌絲消旋Anti-GRIA3 Antibody因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子1(SOCS1)

大腸埃希氏菌鈣結(jié)合樣蛋白/神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤標(biāo)記物抗體Anti-GRIA4 Antibody因子受體樣因子1(CRLF1)

匍枝根霉(黑根霉)絲/蘇蛋白激SRPK7抗體Anti-GRIA3 Antibody維甲結(jié)合蛋白2(CRABP2)

假絲酵母屬磺基葡糖硫抗體Anti-GRIA2 Antibody(PB0202)外信號(hào)調(diào)節(jié)激2(ERK2)

黑柄多孔菌免疫球蛋白μ鏈結(jié)合蛋白2抗體Anti-GRID2 Antibody外信號(hào)調(diào)節(jié)激1(ERK1)

柱枝雙孢霉痙攣性截癱相關(guān)蛋白21抗體Anti-GRIN1 Antibody外基質(zhì)金屬蛋白誘導(dǎo)因子(EMMPRIN)

產(chǎn)黃青霉G蛋白結(jié)合蛋白3抗體Anti-GRIK1 Antibody外基質(zhì)蛋白1(ECM1)

絲/蘇/酪激STYK1抗體腸沙門氏菌腸亞種人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

絲/蘇蛋白激SRPK1抗體摩氏摩根氏菌人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

導(dǎo)向蛋白3B抗體腸沙門氏菌腸亞種旺茲沃思血清型人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

硫酯1抗體熱生腫塊芽孢桿菌人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
WNT抑制劑(CCT251545)委內(nèi)瑞拉鏈霉 聯(lián)氨/N2H4肉絳蟲(chóng)IgE抗體Elisa

白僵 亞硝酸鹽氮/NO2-N衣原體抗體Elisa

解脂假絲酵母 五苯硫酚抗酸性Elisa

根瘤 亞硝酸根（亞硝酸鹽）/NO2-抗酸性磷酸5bElisa

 溴離子（溴化物）/Br-I型膠原交聯(lián)羧基端肽Elisa

枯草芽孢桿 呋喃-2-酸游離甲狀腺Elisa

鴨疫里氏桿 總氮/N游離狀腺原氨酸Elisa

枯草芽孢桿 硝酸鹽氮/NO3-N三磷酸腺苷Elisa

枯草芽孢桿 4'-代苯乙酮幽門螺桿相關(guān)基因蛋白AElisa

假單胞 銣/Rb磷酸糖異構(gòu)Elisa

根瘤 磷酸根（磷酸鹽）/PO43-雌酮Elisa

米根霉 4-氨基-1-丁神經(jīng)酰Elisa

雞腸球 離子(化物)/I-腎Elisa

黃桿 Fmoc-L-瓜氨酸硫酸肝Elisa

炭疽芽孢桿 銨離子/NH4+鈣調(diào)磷酸Elisa