產(chǎn)品屬性:
中文名稱:VEGFR1/2/3抑制劑(Fruquintinib)
英文名稱:Fruquintinib
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
Fruquintinib(HMPL-013)是有效,選擇性的VEGFR1/2/3抑制劑,IC50值分別為33,0.5,and35nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1194506-26-7 別名:HMPL-013 純度:99.93% 分子量:393.39 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
光黑腹菌生物偶聯(lián)血藍(lán)蛋白Anti-GPBAR1 Antibody人Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)
凍膠假絲酵母生物偶聯(lián)牛血清白蛋白Anti-GPC1 Antibody人Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)
湖底肉桿菌BK通道蛋白多肽Anti-GPC5 Antibody人Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)
金灰青霉重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2Anti-GPR1 Antibody人Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)
Acinetobacter preuotii sp.重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白7Anti-GPR107 Antibody人Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)
門多薩假單胞菌炭疽桿菌菌體蛋白Anti-GPR101 Antibody人Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)
黃叉曲霉CD105蛋白Anti-GPR119 Antibody人Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)
菌核青霉瓜環(huán)肽Anti-GPR108 Antibody人Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)
大腸埃希菌C-反應(yīng)蛋白(抗原)Anti-GPR12 Antibody人透明質(zhì)(HA)
癭青霉克侖特羅偶聯(lián)牛血清白蛋白Anti-GPR132 Antibody人透明質(zhì)(HA)
膜醭假絲酵母克侖特羅偶聯(lián)血藍(lán)蛋白Anti-GPR135 Antibody人Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)
香菇畸胎瘤衍化生長因子抗原(表皮生長因子相關(guān)肽)N端Anti-GPR132 Antibody人Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)
芽孢桿菌角蛋白19多肽抗原Anti-GPR137C Antibody人Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)
白色類諾氏菌人癌胚抗原抗原Anti-GPR142 Antibody人Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)
冷桿菌CD105/轉(zhuǎn)化生長因子β受體抗原Anti-GPR139 Antibody人層連蛋白/板層(LN)
棘抱曲霉半胱蛋白蛋白-6(抗原)Anti-GPR143 Antibody人層連蛋白/板層(LN)
痙攣性截癱相關(guān)蛋白21抗體謝氏桿菌人軟骨肉瘤細(xì)胞
G蛋白結(jié)合蛋白3抗體丁梭菌(丁桿菌)小鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞
SPG48蛋白抗體痤瘡桿菌人彌漫大B淋巴瘤細(xì)胞
痙攣性截癱蛋白7/基質(zhì)細(xì)胞粘附調(diào)節(jié)蛋白抗體生孢梭菌(產(chǎn)芽孢梭狀芽孢桿菌)人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞
VEGFR1/2/3抑制劑(Fruquintinib)植物乳桿 水合萜品
孔雀(石)綠褐鏈霉 苯酞
蟲草1-2 米吐爾
耐熱克魯維酵母 優(yōu)巴爾
淺紫灰鏈霉蠶膿亞種 對(duì)稱二苯乙炔
蠟樣芽孢桿 聯(lián)苯甲酰
釀酒酵母 阿西A
土地放線動(dòng)孢 安替比林
孢小克銀漢霉原變種 5-硝基
新城疫病 2-氨基嘧啶
蘇云金芽孢桿 2-氨基芴
墻壁圣格奧爾根 喹吖因
蠟狀芽孢桿 玻璃纖維
絲蓋小包腳菇 漂白土粉
鐮刀 皂土
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)