詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
SB-366791 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
SCIO-469是p38選擇性的ATP競爭抑制劑,IC50值是9nM. 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:472981-92-3 純度:98.01% 分子量:287.74 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
公司產品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
桿菌CD339/Jagged1抗原Anti-GPR146 Antibody人纖連蛋白(FN)
鹽索氏菌即刻早期基因(一種原癌基因)抗原Anti-GPR146 Antibody人纖連蛋白(FN)
植物乳桿菌CD3 epsilon(抗原)Anti-GPR149 Antibody人纖連蛋白(FN)
產氣莢膜梭菌 C型霉偶聯牛血清白蛋白Anti-GPR150 Antibody人纖連蛋白(FN)
類布氏乳桿菌霉偶聯雞卵白蛋白蛋白Anti-GPR149 Antibody人NOGO-A抗體(Nogo-A Ab)
球孢白僵菌干擾誘導T趨化因子抗原Anti-GPR150 Antibody人NOGO-A抗體(Nogo-A Ab)
土壤球菌組織蛋白GAnti-GPR151 Antibody人抗組織轉谷酰抗體IgA(tTG-IgA)
大腸埃希氏菌(大腸桿菌)CD68(多肽抗原)Anti-GPR151 Antibody人抗組織轉谷??贵wIgA(tTG-IgA)
腸沙門氏菌腸亞種乙酰轉移(抗原)Anti-GPR152 Antibody人抗存活抗體/生存蛋白(Surv)
植物乳桿菌高密度脂蛋白受體/清道夫受體抗原Anti-GPR152 Antibody人抗存活抗體/生存蛋白(Surv)
芽孢桿菌柯薩奇病A16型聚蛋白3DAnti-GPR153 Antibody人粒巨噬集落激因子抗體(GM-CSF Ab)
平菇畸胎瘤衍化生長因子抗原(表皮生長因子相關肽)C端Anti-GPR153 Antibody人粒巨噬集落激因子抗體(GM-CSF Ab)
異色擬盤多毛孢CD33抗原(人)Anti-GPR157 Antibody人抗肌聯蛋白抗體(TTN)
巨大香菇肌鈣集蛋白/收鈣Anti-GPR158 Antibody人抗肌聯蛋白抗體(TTN)
*櫻桃鏈格孢角蛋白19抗原Anti-GPR156 Antibody人抗突觸前膜抗體(PsmAb)
云南鞘單胞菌己烯雌偶聯牛血清白蛋白Anti-GPR156 Antibody人抗突觸前膜抗體(PsmAb)
紅細胞血影腦蛋白β2/spectrinβIII抗體干酪乳桿菌干酪亞種人正常結腸上皮細胞
腦磺基轉移樣蛋白4A1抗體巴氏醋桿菌巴氏亞種人Ph+急淋白血病細胞系
突觸結合蛋白14抗體瑞士乳桿菌人腹膜間皮細胞
內質網脂質轉運相關蛋白2抗體乳鏈球菌小鼠胰島瘤胰島a細胞
p38抑制劑(SB-366791)三亞布勒擔子酵母 三苯基氧化膦
矩圓黑盤孢 N-甲基吩甲基硫酸鹽
假單胞 羅丹寧
根瘤 辛可寧
生癌腸桿 脂質體2000
枯草芽孢桿 鈹試劑II
解淀粉芽孢桿 鈹試劑Ⅰ
弗蘭克氏 2-并噻唑
大腸埃希氏桿 順式六氫苯二甲酸酐
巨大芽胞桿 十二烯基丁二酸酐
蘑菇輪枝孢 S-乙酰巰基丁二酸酐
緊密帚枝霉 角鯊烯
樟疫霉 黃蓍樹膠粉
傳染性支氣管炎病 植物凝膠
黃綠鏈霉 氣溶膠OT