商品介紹:
S0859能可逆的高親和性NBC抑制劑,能抑制NBC介導(dǎo)的pH(i)恢復(fù),Ki為1.7_mu_M,*抑制則需30_mu_M。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1019331-10-2 純度:98.0% 分子量:530.04 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
NBC抑制劑(S0859) | S0859 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
肌侵蛋白(MTPN)ELISA Kit英文名稱:MTPN ELISA Kit磷化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)/β鏈接抗體包裝5g
肌腱蛋白X(TNX)ELISA Kit英文名稱:TNX ELISA Kit磷化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)/β鏈接抗體包裝5MG
肌肌激(CKM)ELISA Kit英文名稱:CKM ELISA Kit磷化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)/β鏈接抗體包裝1g
肌紅蛋白(MYO)ELISA Kit英文名稱:MYO ELISA Kit磷化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)/β鏈接抗體包裝5g
肌苷三磷(ITPA)ELISA Kit英文名稱:ITPA ELISA KitβA3/A1-crystallin蛋白抗體包裝25g
肌鈣蛋白T()ELISA Kit英文名稱:TNELISA KitγS-crystallin蛋白抗體包裝100g
肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3復(fù)合體亞基4(ARPC4)ELISA Kit英文名稱:ARPC4 ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框85抗體包裝25g
饑餓(GHRL)ELISA Kit英文名稱:GHRL ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框87抗體包裝5g
回腸脂肪結(jié)合蛋白(FABP6)ELISA Kit英文名稱:FABP6 ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框95抗體包裝25g
黃體激(LH)ELISA Kit英文名稱:LH ELISA Kit補(bǔ)體C1S鏈多肽抗體包裝5g
脫氫(XDH)ELISA Kit英文名稱:XDH ELISA Kit20號(hào)染色體開放閱讀框106抗體包裝50g
緩激肽(BK)ELISA Kit英文名稱:BK ELISA Kit20號(hào)染色體開放閱讀框107抗體包裝100g
環(huán)氧化合物解4(EPHX4)ELISA Kit英文名稱:EPHX4 ELISA Kit20號(hào)染色體開放閱讀框117抗體包裝25g
環(huán)加氧2(PTGS2)ELISA Kit英文名稱:PTGS2 ELISA Kit20號(hào)染色體開放閱讀框118抗體包裝100g
環(huán)加氧1(PTGS1)ELISA Kit英文名稱:PTGS1 ELISA Kit20號(hào)染色體開放閱讀框144抗體包裝25g
曲霉Aspergillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品整合α2試劑盒乙酰紫草;Acetylshikonin
型副傷寒沙門菌Salmonella│paratyphi A 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%,USP34,BR,可用于培養(yǎng)整合A5試劑盒異丹葉大黃;Isorhapontige
花津浦芽孢桿菌Bacillus│hwajinpoensis 質(zhì)量規(guī)格:>97%,USP34,BR真胰島試劑盒7-乙基喜樹堿;7-Ethylcampt
NBC抑制劑(S0859)透明質(zhì)/玻璃抗體(R型)人參皂苷Rh1(標(biāo)準(zhǔn)品) Mevastatin
肝生長因子激活物抑制劑抗體(R型)人參皂苷Rh2 Mevastatin
HA tag標(biāo)簽單克抗體(S型)人參皂3(標(biāo)準(zhǔn)品) 6-Aminopenicillanic acid
血紅抗體(S型)人參皂苷Rh2(標(biāo)準(zhǔn)品) Asparaginase
戊型肝炎病抗體(S型)原人參三 N-Carbobenzyloxy-L-alanine
神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1抗體(±)-柚皮(標(biāo)準(zhǔn)品) Z-Gln-OH
神經(jīng)膠質(zhì)生長因子/神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白β抗體1,2,3,4,6-O-沒食子酰葡萄糖(標(biāo)準(zhǔn)品) CBZ-L-Gly
組三聚體核苷結(jié)合蛋白1抗體1,2-O-Dilinoleoyl-3-O-β-D-g... Proparacaine HCl
組蛋白去乙?;?/span>3抗體1,3-二咖啡??鼘?標(biāo)準(zhǔn)品) Z-Ser-OH