Gill蘇木素染色液(Gill No.2)

Gill蘇木素染色液(Gill No.2)公司正在出售的產(chǎn)品：E Tag/FITC 熒光標(biāo)記抗E Tag抗體IgG癸二二酯 97%
ets1/E26 /FITC 熒光標(biāo)記Ets轉(zhuǎn)錄因子家族e(cuò)ts1抗體IgG馬來(lái)二酯 96%
Eukaryotic aspartyl protease/FITC 熒光標(biāo)記天冬氨蛋白家族蛋白抗體IgG馬來(lái)二烯酯 97%
EV71/FITC 熒光標(biāo)記腸道病71型/手

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
兔耳草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Coptisine chloride三聚抗體包裝25g

菟絲子（南方菟絲）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Lycorine chloride磷化雷帕霉靶蛋白抗體包裝5g

蛻皮激（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Betaine hydrochloride黑皮質(zhì)-1受體抗體包裝1g

脫落(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： Berbamine hydrochloride胃動(dòng)抗體包裝25g

脫氫齒孔英文名稱(chēng)： Leonurine hydrochloride甘露聚糖結(jié)合凝集抗體包裝5g

脫氫紫堇堿;去氫紫堇堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Myricetrin膜相關(guān)環(huán)指蛋白11抗體包裝100g

脫穿心蓮內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： Tectochrysin結(jié)核分枝桿菌Ag85B抗體包裝25g

脫穿心蓮內(nèi)酯琥珀半酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： Senkyunolide A磷化微管相關(guān)蛋白4抗體包裝5g

脫羊藿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： Oxysophocarpine磷化微管相關(guān)蛋白4抗體包裝100g

脫氧熊果苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： Belinostat (PXD101)人痘帶狀皰疹病gE蛋白抗體包裝25g

脫氧野尻霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： Oxypeucedanin黑色瘤相關(guān)抗原G1/肝癌相關(guān)蛋白4抗體包裝25g

拓?fù)涮婵蝶}鹽（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Crotaline;Monocrotaline黑色瘤相關(guān)抗原B6抗體包裝5g

瓦松（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Scularin黑色瘤相關(guān)抗原C2抗體包裝1g

萬(wàn)丈深（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Scularein黑色瘤抗原樣基因2抗體包裝25g

萬(wàn)丈深（綠莖還陽(yáng)參）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： 8-O-Acetyl shanzhiside methyl ester黑色瘤相關(guān)抗原C1抗體包裝5g

尖鐮孢古巴專(zhuān)化型（香蕉枯萎病菌）Fusarium│oxysporum 質(zhì)量規(guī)格：純度≥99.0%，BR,可用于培養(yǎng)巨噬移動(dòng)抑制因子試劑盒橙黃決明-6-葡萄糖苷;

: 387資源名稱(chēng): 赭褐鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR巨噬炎性蛋白5試劑盒次大風(fēng)子;Hydnocarpin

中華單頂孢Monacrosporium│sinense 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定巨噬炎性蛋白3β試劑盒醋棉酚;Gossypol-acetic
Gill蘇木素染色液(Gill No.2)越南芽孢桿 2-硝基-4--6-溴苯末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9Elisa

釀酒酵母 1,2-二溴四氟苯鈉-葡萄糖共轉(zhuǎn)運(yùn)載體1Elisa

Gordonia 扁桃酸乙酯腦鈉;腦鈉尿肽Elisa

膠韌革(榆耳，榆蘑) 3-溴-4-氟甲酯腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子Elisa

異常漢遜酵母 5-氨基-1-苯基吡唑內(nèi)Elisa

聚多曲霉 N-十六烷基苯甲酰內(nèi)皮Elisa

矩圓黑盤(pán)孢 2,6-二-5-氟煙酸內(nèi)皮1Elisa

馬克斯克魯維酵母 3-基-2,6-二-5-氟吡啶內(nèi)皮型一氧化氮合Elisa

三骨菇 2-苯基異丁酸內(nèi)皮脂肪Elisa

雜色曲霉 3-氟-4-內(nèi)源性分泌型糖基化終末產(chǎn)物受體Elisa

中華芽孢桿 4-戊基雙環(huán)己內(nèi)脂Elisa

枯草芽孢桿 3-氨基-5-叔丁基吡唑黏著斑激Elisa

山楂生葉點(diǎn)霉 2-重氮乙酰乙酸對(duì)硝基芐酯尿蛋白Elisa

巴氏醋桿 2-氨基-3-氟尿苷二磷酸葡萄糖酸轉(zhuǎn)移1Elisa

產(chǎn)氨短桿 4-甲氧基芐尿肌酐Elisa