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抗酒石酸酸性磷酸酶染液

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更新時間:2022-04-21 14:54:16瀏覽次數(shù):441

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 20T
貨號 GOY-01X9790 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
抗酒石酸酸性磷酸酶染液公司*的產(chǎn)品:NKG2D/CD314 NK受體2D抗體N--1-萘鹽鹽 97%
NKR(Neuromedin B Receptor) 神經(jīng)激肽B受體抗體炔 98%
NKR/Neurokin B receptor 神經(jīng)激肽B受體抗體三苯銻 97%
Nm23 腫瘤轉(zhuǎn)移抑制因抗體2-(硅) 98%
Nm23-H1 腫瘤抑制因抗體海藻 CP
Nm23-H2 腫瘤抑制

詳細介紹

產(chǎn)品屬性:

中文名稱:抗酒石酸酸性磷酸酶染液

英文名稱:

產(chǎn)品規(guī)格:20T

發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹:

檢驗原理:

在酸性的緩沖液中,細胞內(nèi)酸性磷酸酶催化底物水解,其生成物進而與一種穩(wěn)定的重氮鹽偶聯(lián),生成不溶性的偶氮染料沉淀,當(dāng)?shù)孜镏写嬖诰剖釙r,該反應(yīng)只出現(xiàn)在特異性細胞中。

用途:

抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)染色可以了解破骨細胞的功能狀態(tài),并對毛細胞性白血病有助診斷,本染液可用于石蠟切片、血液、骨髓及培養(yǎng)細胞的涂片、爬片、以及冰凍切片的細胞染色。

儲存:4℃,有效期6個月。

細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:

細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:

①細胞核、染色體以及基因表達的研究;

②生物膜與細胞器的研究;

③細胞骨架體系的研究;

④細胞增殖及其調(diào)控;

⑤細胞分化及其調(diào)控;

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);

⑦細胞的起源與進化;

⑧細胞工程.

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

鹽伊托必利(標準品)英文名稱: Oleanolic acid電子轉(zhuǎn)移黃蛋白脫氫抗體包裝25g

鹽依匹斯汀(標準品)英文名稱: Oleanolic acidEGF受體7跨膜結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體包裝5g

鹽乙?。藴势罚┯⑽拿Q: Oleanolic acid乙激2抗體包裝25g

鹽乙哌立松(標準品)英文名稱: Shikimic acid磷化Ets轉(zhuǎn)錄因子家族ets1抗體包裝5g

鹽異(標準品)英文名稱: Shikimic acid磷化上皮癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體包裝100g

鹽異腎上腺(標準品)英文名稱: Riociguat嗜性粒過氧化物抗體包裝10g

鹽左西替利(標準品)英文名稱: Pheniramine Maleate核內(nèi)切G抗體包裝25g

鹽左旋咪唑(標準品)英文名稱: FTase Substrate, Fluorogenic酪蛋白激受體A10抗體包裝500g

鹽左氧沙星(標準品)英文名稱: Linaclotide 胞吐囊復(fù)合體蛋白2抗體包裝100ml

氧沙星(標準品)英文名稱: benzoylpaeoniflorin 磷化4E結(jié)合蛋白1抗體包裝25ml

(標準品)英文名稱: 3,4,5-Tricaffeoylquinic acid磷化絲裂原活化蛋白激1/2抗體包裝1g

葉(標準品)英文名稱: Alisol A 24-acetate泛交聯(lián)抗體包裝250mg

伊潘立(標準品)英文名稱: Alisol C monoacetate EB病核抗原-3B抗體包裝100g

伊曲康唑(標準品)英文名稱: Sclareolide磷化驅(qū)動蛋白樣蛋白1抗體包裝25g

伊索拉定(標準品)英文名稱: Sclareolide乙?;D(zhuǎn)移EID1抗體包裝5g

: IFFI06005資源名稱: 嗜乳桿菌 質(zhì)量規(guī)格:potency>980ug/mg,BR糖原合成激3試劑盒桑皮苷A;mulberroside A

土地戈登氏菌Gordonia│terrae 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品糖原合成激試劑盒麝香;3-Methylcyclopen

果生鏈核盤菌Monilinia│fructigena Honey 質(zhì)量規(guī)格:94.0-105.0%,USP,BR糖原合成天然;Borneol
抗酒石酸酸性磷酸酶染液球形芽孢桿 葉綠銅鈉鹽戊型肝炎病抗原Elisa

地中海擬無枝酸 沙美特羅類白抗原B27Elisa

熱帶假絲酵母 苯基-β-D-吡喃半乳糖苷補體因子PElisa

出芽短梗霉 5-氨基異酞酸單甲酯絲氨酸肽抑制因子Kazal型4Elisa

空腸彎曲桿 芐基苯基碳酸酯色P4503A4Elisa

佛雷德里克斯堡假單胞 2-氨基-6-溴乙型腦炎病IgG抗體Elisa

Aurantimonas coralicida 2,6,7-三氯-3-三氟甲基喹喔啉維甲酸誘導(dǎo)基因1蛋白Elisa

疏水戈登氏 N-異基-4甲酸類固硫酸酯Elisa

熒光假單胞 9-雙環(huán)[3.3.1]壬烷磺基轉(zhuǎn)移Elisa

濟州單胞 鄰芐基苯3β羥基5類固脫氫Elisa

黑根霉 9-溴-1-壬烯膽固7α羥化Elisa

谷氨酸棒桿 2-溴-6-羥基吡啶類固17α單加氧Elisa

蠟狀芽孢桿 4-(2,2,2-三氟乙氧基)類固異構(gòu)Elisa

油菜核病 4-氨基-2-氯-3-硝基吡啶皮質(zhì)類固11β脫氫同工1Elisa

施氏假單胞 L-乳酸鋰皮質(zhì)類固11β脫氫同工2Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

 


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