Weil髓鞘染色液

Weil髓鞘染色液公司正在出售的產(chǎn)品：FOSL2/FITC 熒光標(biāo)記兔抗FOSL2抗體IgGD-果糖 分析標(biāo)準(zhǔn)品
FOXJ1/HFH-4/FITC 熒光標(biāo)記抗插頭蛋白J1抗體IgGD-果糖 Ph. Eur., BP,USP
FOXO1/FOXO1A/FITC 熒光標(biāo)記叉頭轉(zhuǎn)錄因子O1抗體IgGD-果糖 99%，用于培養(yǎng)
Phospho-FoxO1 (Thr24)/FoxO3a (Thr32)

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

新穿心蓮內(nèi)酯（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Tenacissoside H粘附分子3抗體（脊髓灰質(zhì)炎病受體相關(guān)蛋白3）包裝5g

新地奧斯明英文名稱： Cucurbitacin E螺旋環(huán)螺旋蛋白2抗體包裝1g

新綠原(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Koumine胚胎發(fā)育相關(guān)蛋白Nodal抗體包裝5g

新芒果苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Gelsemine增殖相關(guān)蛋白NANOS1抗體包裝1g

新藤黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Procyanidin B1同源盒蛋白NOBOX抗體包裝5g

新烏頭原堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Cyasterone轉(zhuǎn)錄因子NAC1抗體包裝100g

杏葉防風(fēng)（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Tetrahydroberberine,THB神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體抗體包裝25g

雄蠶蛾（家蠶）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Tenacissoside I磷化KB抑制蛋白激ε包裝500g

熊膽粉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Tenacissoside G磷化神經(jīng)纖毛蛋白1抗體包裝1g

熊果苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Praeruptorin C1型神經(jīng)纖維瘤抗體包裝250mg

熊果；烏蘇(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Pterostilbene磷化1型神經(jīng)纖維瘤抗體包裝5g

繡線菊（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Pterostilbene中心粒蛋白Nudel抗體包裝100g

溴東莨菪堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Rotenone磷化中心粒蛋白Nudel抗體包裝25g

徐長(zhǎng)卿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 7-Epitaxol類固脫氫樣蛋白NSDHL抗體包裝25g

續(xù)斷（川續(xù)斷）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Solasodine磷化核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體包裝5g

熒光假單胞菌Pseudomonas│fluorescens 質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR解整合樣金屬蛋白33試劑盒川芎;Tetramethylpyraz

裂孔平伏菌Poria│versipora (Pers.) Romell 質(zhì)量規(guī)格：>99%解整合樣金屬蛋白19試劑盒茶多酚;Tea polyphenol

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品解整合樣金屬蛋白15試劑盒茶;L-Theanine
Weil髓鞘染色液稻麥穗孢霉 草酸鋅糖化血紅蛋白A1cElisa

無花果曲霉 L-2-溴苯氨酸糖化血清蛋白Elisa

芹側(cè)耳（杏鮑菇） 1-(3-氟-4-基)乙酮糖皮質(zhì)Elisa

傳染性法氏囊病病 3--4--1-磺酰糖皮質(zhì)類固受體Elisa

金太陽杏葉細(xì)性穿孔病 4--3-甲糖原合成Elisa

青灰紅菇 N-4-苯甘氨酸糖原合成激Elisa

金黃殼囊孢 3-甲基嗎啉糖原磷酸化Elisa

大腸埃希氏 3-肼基吡啶天門冬氨酸Elisa

木糖葡萄球 5-氨基-2-甲酯谷草轉(zhuǎn)氨;天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移Elisa

木霉 2-嗎啉基鐵蛋白Elisa

構(gòu)巢曲霉 4-叔丁基芐鐵調(diào)Elisa

孢小克銀漢霉輪生變種 2-甲酸甲酯同型半胱氨酸Elisa

墳?zāi)构?jié)桿 4-氧代酮鹽酸鹽銅鋅超氧化物歧化1Elisa

賴氨酸芽孢桿 5-硝基-1,2,3,4-四氫異喹啉鹽酸鹽酮體Elisa

三葉草根瘤 4-(9H-咔唑-9-基)苯酸透明帶結(jié)合蛋白3Elisa