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技術文章

ATCC菌種傳代實驗過程

閱讀:392          發(fā)布時間:2018-1-16

ATCC菌種在傳代過程中,原有的性狀會逐漸下降,這就是菌種的衰退。衰退是菌株的自發(fā)突變引起的,一旦發(fā)現(xiàn)衰退,就必須進行復壯。復壯就是通過純種分離和性能測定等方法從衰退的群體中找出未衰退的個體,以達到恢復該菌種原有性狀的一種措施。菌種活化就是逐級擴大培養(yǎng)是為了得到純而壯的培養(yǎng)物,即獲得活
力旺盛的、接種數(shù)量足夠的培養(yǎng)物。菌種發(fā)酵有一般需要2-3代的復壯過程,因為保存時的條件往往和培養(yǎng)時的條件不相同,所以要活化,讓菌種逐漸適應培養(yǎng)環(huán)境。 
實驗器材與試劑 
1、菌種
側(cè)孢芽胞桿菌斜面保藏菌種 
2、實驗器材
天平、手提式電熱滅菌鍋、超凈工作臺、接種環(huán)、電熱鼓風干燥箱、生化培養(yǎng)箱、光學顯微鏡、電爐、酒精燈、鐵架臺、玻璃漏斗、試管、三角瓶、載玻片等 
3、試劑
葡萄糖、蛋白胨、氯化鈉、復紅染色液、結(jié)晶紫染色液、盧哥氏碘液、95%乙醇、番紅染色液、香柏油、氫氧化鈉、鹽酸
實驗步驟 
1、斜面培養(yǎng)基配方:葡萄糖10g、蛋白胨10g、氯化鈉5g、水1000mL、瓊脂20g、pH值7.2~7.4。
2、按配方準確稱取所需的藥品,溶解、過濾、分裝、包扎、滅菌(121℃30min)、冷卻、擺斜面。
3、斜面無菌檢查。28℃,37℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)觀察。
4、接種:無菌室清潔、紫外燈滅菌、操作人員清潔、消毒、用接種環(huán)接種斜面。 
5、培養(yǎng):37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1d。 
6、重復轉(zhuǎn)接3代斜面
7、鏡檢。分別用簡單染色或革蘭氏染色涂片觀察,菌的生長情況,是否有雜菌。 8、生長好的菌種置冰箱中保藏備用。 
ATCC菌種注意事項
1、滅菌要*,冷氣一定排盡,并保證滅菌溫度和時間。 
2、接種時要嚴格按無菌操作規(guī)程進行。
        氟化牙粉:單氟磷酸鈉(1500 ppm)/二氧化硅標準品    5.25oz
        " 
氟化牙粉:單氟磷酸鈉(1000 ppm)/二氧化硅標準品 
 
"    5.25oz
50-56-6         羥可待酮標準品    5 vials
9002-60-2    Corticotropin    促腎上腺皮質(zhì)激素標準品    5 vails
04-93-9         鹽酸萬古霉素標準品    4vials
        氟化牙粉:氟化亞錫-二氧化硅標準品    4oz
        氟化牙粉:氟化鈉/碳酸氫鈉粉標準品    4oz
118-71-8     Maltol     麥芽酚標準品    4g
23964-58-1    Articaine    阿替卡因標準品    40mg
    Articaine Related Compound A    阿替卡因相關物質(zhì)A標準品    40mg
    Articaine Related Compound E    阿替卡因相關物質(zhì)E標準品    40mg
ATCC菌種

 

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