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技術(shù)文章

ATCC菌種的分離與育種的標(biāo)準(zhǔn)

閱讀:327          發(fā)布時間:2018-7-24

   ATCC菌種的分離有組織分離、孢子分離及基質(zhì)內(nèi)菌絲分離三種方法?;|(zhì)內(nèi)菌絲分離因易污染較少采用。孢子分離法多在研究及菌株復(fù)壯時采用。規(guī)模時采用的是子實(shí)體菌絲分離法,該法操作簡便,且能保持原有菌株的優(yōu)良品性。
(一)孢子分離法
    取發(fā)育正常、健壯、已開始彈射孢子的靈芝子實(shí)體。切除菌柄,無菌條件下用75%酒精進(jìn)行表面消毒,用無菌水多次沖洗,再用無菌棉擦拭干凈。將菌管朝下放在經(jīng)滅菌的培養(yǎng)皿內(nèi),外罩以用75%酒精擦拭過的玻璃罩,在25~30℃條件下經(jīng)過5~6小時后孢子散落在培養(yǎng)皿底部,用接種針挑取少量孢子放入試管斜面培養(yǎng)基中部,移至培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。分離用的培養(yǎng)基可采用普通馬鈴薯培養(yǎng)基、麩皮提取液培養(yǎng)基等。
    孢子分離法污染率較高,應(yīng)及時檢查挑棄被雜菌污染的試管。待孢子萌發(fā)出菌絲時,應(yīng)連同少量培養(yǎng)基挑出及時移管。
可將子實(shí)體切成蠶豆大的種塊,用無菌鐵鉤固定后置三角瓶中,瓶底有1cm后培養(yǎng)基,塞上棉塞。見孢子彈射后并萌發(fā)出菌絲時及時移管。
野外分離靈芝孢子時因條件限制,可將菌肉(帶菌管)貼在試管壁上,待孢子彈射入培養(yǎng)基后及時轉(zhuǎn)管。
   孢子萌發(fā)后先形成一級菌絲,幾天后便可形成二級菌絲。如果在顯微鏡下觀察到鎖狀聯(lián)合,一般即可確定為得到了靈芝菌絲。
(二)基質(zhì)內(nèi)菌絲分離法
   這是利用靈芝生長的基質(zhì)作為分離材料獲得靈芝菌種的一種方法。其優(yōu)點(diǎn)是在靈芝子實(shí)體已衰老時仍可以獲得靈芝純菌絲體。但是,在子實(shí)體生長時,基質(zhì)內(nèi)的靈芝菌絲體不是單獨(dú)存在的,往往和細(xì)菌、放射菌、霉菌及其他真菌生長在一起。為獲得純靈芝菌絲體,分離時注意分離材料的選擇,選靈芝菌絲生長好,菇木尚未腐爛的作為分離材料。ATCC菌種分離時接種塊盡可能小些,所分離的菌種要經(jīng)出菇試驗(yàn)確認(rèn)是優(yōu)良菌株才可在上使用。

 Phospho-MARCKS (Ser152/156) 毒蕈堿型乙酰膽堿受體M1抗體

 Phospho-Mcl1 (Ser159/Thr163) 丁酰膽堿酯酶抗體(N端)

 phospho-M-CSF Receptor(Tyr546) 丁酰膽堿酯酶抗體(C端)

 phospho-M-CSF Receptor(Tyr708) 丁酰膽堿酯酶單克隆抗體

 phospho-M-CSF Receptor(Tyr809) 調(diào)亡誘導(dǎo)因子抗體

 Phospho-MDM2 (Ser166) 調(diào)亡誘導(dǎo)因子抗體

 Phospho-MEF2A (Ser408) 調(diào)節(jié)染色體組裝激酶1抗體

 Phospho-MEF2A (Thr312) 凋亡抑制因子5抗體
ATCC菌種

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