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磺胺二甲嘧啶檢測試劑盒樣本前處理步驟
閱讀:216 發(fā)布時間:2021-3-11磺胺二甲嘧啶檢測試劑盒樣本前處理步驟:
注:樣本處理前須知
處理任何樣本時,都必須注意:
(a)實驗中必須使用一次性吸頭,在吸取不同的試劑時要更換吸頭。
(b)實驗之前須檢查各種實驗器具是否干凈,必要時可對實驗器具進行清潔,以避免污染干擾實驗結(jié)果。樣本前處理需配制:
配液1:衍生化試劑15.1mg2-硝基苯jia醛
加甲醇10ml溶解(濃度為10mM)。
配液2:用去離子水將2×濃縮復溶液按1:1稀釋(1份濃縮復溶液+1份去離子水)用于抗體稀釋和樣本的復溶。
配液3:0.1MK2HPO422.8gK2HPO4?3H2O
加去離子水溶解定容至1L。
配液4:1MHCl8.3ml濃HCl
用去離子水定容至100ml。
配液5:1MNaOH4gNaOH
用去離子水溶解定容至100ml。
(a)水產(chǎn)樣本前處理
┅┅用均質(zhì)器均質(zhì)樣本;
┅┅取1±0.05g的均質(zhì)物(魚/蝦),分別加入4ml的蒸餾水,0.5ml1MHCL和100ml衍生化試劑,充分振蕩;
┅┅在37oC過夜孵育(大約16h);
┅┅分別加入5ml0.1MK2HPO4,0.4ml1MNaOH和5ml乙酸乙酯,劇烈振蕩30s;
┅┅在室溫下(20-25oC/68-77℉)3000g以上離心10min;
┅┅取出2.5ml乙酸乙酯到另一個容器中50oC下氮氣吹干或旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸干;
┅┅用1ml正己烷(或正庚烷)溶解干燥物,用1ml已稀釋好的復溶液充分混合;
┅┅在室溫下(20-25oC/68-77℉)3000g以上離心10min;
┅┅取50ml下層液體用于分析。
樣本稀釋倍數(shù):2
注:樣本應當保存在陰涼避光處并且需要冷藏保存。