將濾紙剪成0.5cm31.2cm的小條,裝入0.6cm38cm的安瓿管中,每管1~2張,塞以棉塞,121℃滅菌30min。將需要保存的菌種,在適宜的斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng),充分生長。
取滅菌脫脂牛乳(脫脂牛乳的處理：牛乳2000r/min離心10min脫脂,然后115℃滅菌20min,或間歇滅菌3次,經(jīng)檢查無菌后備用)1~2mL滴加在滅菌培養(yǎng)皿或試管內(nèi),取數(shù)環(huán)菌苔在牛乳內(nèi)混勻,制成濃懸液。
用滅菌鑷子自安瓿管取濾紙條浸入菌懸液內(nèi),使其吸飽,再放回至安瓿管中,塞上棉塞。將安瓿管放入內(nèi)有P2O5作吸水劑的干燥器中,用真空泵抽氣至干。將棉花塞入管內(nèi),用火熔封,保存于低溫下。需要使用菌種,復活培養(yǎng)時,可將安瓿管口在火焰上燒熱,滴一滴冷水在燒熱的部位,使玻璃破裂,再用鑷子敲掉口端的玻璃,待安瓿管開啟后,取出濾紙,放入液體培養(yǎng)基內(nèi),置溫箱中培養(yǎng)。