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技術文章

貓、狗內源性對稱二甲基精氨酸(SDMA)定量測定試劑盒(酶聯免疫法)

閱讀:3090          發(fā)布時間:2020-8-17

對稱二甲基精氨酸(SDMA)是一種甲基化的精氨酸。SDMA來自于L -精氨酸殘基的核內甲基化,在蛋白水解后釋放到細胞質中。SDMA由腎臟排出。

 

幾項研究發(fā)現,每3只貓和每10只狗中就有1只可能在它們的一生中患上腎病。

 

SDMA是腎臟功能的早期生物標志物。它與腎小球濾過率(GFR)有很好的相關性。平均而言,腎功能喪失30 - 40%的慢性腎病(CKD)患者中,SDMA增加。然而,直到75%的腎功能喪失,肌酐才會增加。獸醫(yī)檢測SDMA將比肌酐或胱抑素C測試更早地診斷慢性腎臟疾病(CKD)。

 

SDMA對腎功能有特異性。不受肝病、心血管疾病、炎癥、內分泌疾病等疾病的影響。SDMA另一個令人興奮的特點是它也不受肌肉質量的影響,這簡化了對瘦的老年動物,特別是貓和患有其他導致肌肉萎縮疾病的動物CKD的診斷和監(jiān)測。

 

競爭性的SDMA-ELISA試劑盒采用微孔板檢測。SDMA與微孔板的固相結合。樣品中的SDMA被?;⑴c固相結合的SDMA競爭固定數量的兔抗SDMA抗血清結合位點。當系統(tǒng)處于平衡狀態(tài)時,通過洗滌去除游離抗原和游離抗原-抗血清復合物。通過抗兔/過氧化物酶檢測與固相SDMA結合的抗體。在450 nm處檢測底物TMB /過氧化物酶反應。與固相SDMA結合的抗體量與樣品中SDMA濃度成反比。

 

 

加樣方案

樣本準備

 

標準品

質控品

樣本

標準品1-6  (μL)

20

 

 

質控品1和2 (μL)

 

20

 

樣本(μL)

 

 

20

?;彌_液

(μL)

20

20

20

平衡試劑

(μL)

200

200

200

 

板子在定軌振蕩器上振蕩10s

酰化試劑

(μL)

50

50

50

 

定軌振蕩器室溫孵育20分鐘
每樣20μL用于ELISA試驗。

ELISA加樣方案

 

標準品

質控品

樣本

標準品1-6(μL)

20

 

 

質控品1和2(μL)

 

20

 

樣本(μL)

 

 

20

抗血清(μL)

50

50

50

蓋上板膜在定軌振蕩器上室溫孵育90分鐘

洗板4次,每次用300μL洗液

結合物(μL

100

100

100

在定軌振蕩器上室溫孵育30分鐘

洗板4次,每次用300μL洗液

 

底物液(μL

100

100

100

在定軌振蕩器上室溫孵育25±5分鐘

終止液(μL

100

100

100

讀取450nm波長吸光度

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