壓力蒸汽滅菌生物指示劑的原理主要基于特定細(xì)菌芽孢對壓力蒸汽的耐受性以及芽孢復(fù)蘇后的生長特性來判斷滅菌效果,具體如下:
細(xì)菌芽孢的選擇:壓力蒸汽滅菌生物指示劑中通常含有嗜熱脂肪桿菌芽孢(ATCC7953)等13。細(xì)菌在不良環(huán)境條件下會形成芽孢,芽孢具有很強的耐熱性、耐干燥性和耐化學(xué)性等,能夠在極duan環(huán)境下生存。在壓力蒸汽滅菌過程中,如果滅菌條件不達(dá)標(biāo),這些芽孢就有可能存活下來。
滅菌過程中的挑戰(zhàn):當(dāng)把含有細(xì)菌芽孢的生物指示劑與待滅菌物品一起放入壓力蒸汽滅菌器時,滅菌器內(nèi)的高溫高壓環(huán)境會對細(xì)菌芽孢產(chǎn)生作用。在設(shè)定的滅菌溫度(如 121℃或 134℃)和時間下,理論上可以殺死絕大部分的微生物。然而,如果滅菌器出現(xiàn)故障、操作不當(dāng)或者滅菌條件未達(dá)到要求,細(xì)菌芽孢就可能沒有被完quan殺滅3。
培養(yǎng)后的判斷:
陰性結(jié)果判斷:滅菌結(jié)束后,將生物指示劑取出進(jìn)行培養(yǎng)。如果滅菌過程有效,細(xì)菌芽孢會被徹di殺滅,在適宜的培養(yǎng)條件下不會有細(xì)菌生長,培養(yǎng)液的顏色等指標(biāo)不會發(fā)生變化,通常會保持初始的顏色或狀態(tài),這就表明滅菌合格。
陽性結(jié)果判斷:如果滅菌不完quan,細(xì)菌芽孢在培養(yǎng)過程中會復(fù)蘇并開始生長繁殖。芽孢復(fù)蘇后,細(xì)菌會進(jìn)行新陳代謝,產(chǎn)生各種代謝產(chǎn)物,這些代謝產(chǎn)物會改變培養(yǎng)液的酸堿度等性質(zhì)。例如,代謝產(chǎn)生的酸會使培養(yǎng)液的 pH 值降低,從而觸發(fā)培養(yǎng)液中酸堿指示劑的顏色變化,提示滅菌不合格。
總之,壓力蒸汽滅菌生物指示劑通過模擬滅菌過程中最難以殺滅的微生物情況,利用細(xì)菌芽孢的特性和培養(yǎng)后的生長表現(xiàn),來直觀地反映壓力蒸汽滅菌的效果是否達(dá)到了預(yù)期的無菌要求。