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液氮研磨的應(yīng)用原理及注意事項(xiàng)

閱讀:9572      發(fā)布時(shí)間:2021-11-12
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  原理
  分子生物學(xué)是當(dāng)前生命科學(xué)領(lǐng)域的前沿學(xué)科,其理論與技術(shù)已滲透到各學(xué)科領(lǐng)域,而分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)在生命科學(xué)研究中顯得相當(dāng)重要。在實(shí)際工作中,許多實(shí)驗(yàn)材料比如動(dòng)物身上的肌肉組織、結(jié)締組織、骨組織、毛發(fā)組織等,植物的根、莖、葉、種子等均需磨碎,隨后才能對(duì)其成分、基因與蛋白質(zhì)及結(jié)構(gòu)和功能進(jìn)行研究。
  液氮研磨在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用廣泛,特別是有關(guān)核糖核酸(RNA)、脫氧核糖核酸(DNA)的分離。液氮的溫度為一196℃,它既能使各種組織成分不易被破壞或降解,又能使組織變硬,脆性增加易于磨碎。正是由于液氮的溫度極低,操作時(shí)要特別小心。液氮研磨,一是為了終止細(xì)胞內(nèi)外一切生物反應(yīng),比如提取RNA時(shí),防止RNA酶的降解反應(yīng)等;還有一個(gè)原因,就是在液氮中的細(xì)胞*凍硬了,研磨可以達(dá)到很好的破胞效果,將細(xì)胞磨成粉,使里邊的物質(zhì)釋放出來。
  液氮研磨注意事項(xiàng):
  1、把樣品放入研缽中,倒入少量液氮,液氮就會(huì)像沸騰了一樣,這時(shí)候迅速研磨。動(dòng)作一定不要太大,最好是用手心的力量往下旋轉(zhuǎn)著碾碎,動(dòng)作太大會(huì)把樣品濺飛,如果樣品量很少直接就可能磨沒了。大約幾秒沸騰就結(jié)束,再磨幾下就可以再加入點(diǎn)液氮,重復(fù)以上過程,直到認(rèn)為磨得比較細(xì)了為止。
  2、液態(tài)氮在常壓時(shí)的溫度相當(dāng)?shù)牡?,一旦與物體表面接觸將迅速地沸騰,同時(shí)也會(huì)帶走相當(dāng)大量的熱能。因此,使用液態(tài)氮時(shí)須額外注意,避免與皮膚的直接接觸。
  3、裝填時(shí)應(yīng)穿戴護(hù)具,如:防凍手套。切忌使用棉質(zhì)手套,棉質(zhì)手套會(huì)借由毛細(xì)現(xiàn)象吸著大量的液態(tài)氮而提高凍傷的可能性(甚至比不穿戴還要危險(xiǎn))。
 

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