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技術(shù)文章

ELISA 系列?細(xì)菌內(nèi)毒素(ET)

閱讀:311          發(fā)布時(shí)間:2023-6-20

細(xì)菌內(nèi)毒素,又稱為“熱原",細(xì)菌內(nèi)毒素是革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁上的特結(jié)構(gòu),細(xì)菌在存活狀態(tài)時(shí)不釋放出來,只有當(dāng)細(xì)菌死亡自溶時(shí)才釋放到細(xì)胞外,表現(xiàn)多種毒性作用,為區(qū)別于外毒素而稱之為內(nèi)毒素。


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細(xì)菌內(nèi)毒素,英文稱作Endotoxin,是G-菌細(xì)胞壁個(gè)層上的有結(jié)構(gòu),內(nèi)毒素為外源性致熱原,它可激活中性粒細(xì)胞等,使之釋放出一種內(nèi)源性熱原質(zhì),作用于體溫調(diào)節(jié)中樞引起發(fā)熱。細(xì)菌內(nèi)毒素的主要化學(xué)成分為脂多糖。


細(xì)菌內(nèi)毒素是由脂多糖(LPS)、蛋白質(zhì)和磷脂組成的高分子量復(fù)合物,發(fā)揮毒性的成分主要為類脂質(zhì)A(Lipid A),類脂A是LPS活性不缺少的部分, 可視作LPS 的“生物活性中心"。

一般細(xì)菌毒素可分為兩類,一類為外毒素(Exotoxin);它是一種毒性蛋白質(zhì),是細(xì)菌在生長過程中分泌到菌體外的毒性物質(zhì)。產(chǎn)生外毒素的細(xì)菌主要是革蘭氏陽性菌。如白喉?xiàng)U菌、破傷風(fēng)桿菌、肉毒桿菌、金黃色葡萄球菌以及少數(shù)革蘭氏陰性菌。另一類為內(nèi)毒素(Endotoxin)。是革蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁的產(chǎn)物。細(xì)菌在生活狀態(tài)時(shí)不釋放出來,只有當(dāng)細(xì)菌死亡自溶或粘附在其它細(xì)胞時(shí),才表現(xiàn)其毒性,內(nèi)毒素的主要化學(xué)成分是脂多糖中的類脂A成分。

酶聯(lián)免疫測定法(ELISA),可用于定量檢測內(nèi)毒素的含量, 它是基于抗原抗體的酶聯(lián)免疫測定法,由外加熱原質(zhì)刺激巨噬細(xì)胞后產(chǎn)生的內(nèi)熱原物質(zhì)如腫瘤壞死(TNF)因子白細(xì)胞介素1(IL-1)等而進(jìn)行測定的。

內(nèi)毒素檢測的意義有哪些?

細(xì)菌內(nèi)毒素具有多種生物學(xué)活性,微量的內(nèi)毒素進(jìn)入機(jī)體將會(huì)出現(xiàn)發(fā)熱、血壓降低、寒戰(zhàn)、引起DIC、內(nèi)毒素?cái)⊙Y等一系列臨床反應(yīng),因此內(nèi)毒素快速定量檢測,對(duì)臨床對(duì)癥治療具有很深的現(xiàn)實(shí)意義。

①內(nèi)毒素檢測不僅有助于鑒別是否為細(xì)菌感染,尤其是對(duì)于革蘭陰性桿菌感染具有重要的參考價(jià)值,還能提示感染嚴(yán)重程度,可用于發(fā)熱原因的快速輔助診斷。

②有利于臨床及早診治疾病,為選擇用藥提供一定理論依據(jù),對(duì)病情進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測,對(duì)給藥后的療效及預(yù)后判斷具有重大意義。

③用于血液透析液的監(jiān)測,對(duì)于保證治療效果和患者安全有著重要作用。



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