詳細(xì)介紹
透射電鏡全套
透射電鏡制片步驟1、 取材固定:新鮮組織確定取材部位,盡量減小牽拉、挫傷與擠壓等機械損傷,組織體積一般不超過1mm×1mm×1mm ,迅速投入電鏡固定液4℃固定2-4h。細(xì)胞離心至管底可以看到綠豆大小的細(xì)胞團(tuán)塊,棄去培養(yǎng)液加入電鏡固定液4℃固定2-4h。0.1M磷酸緩沖液PBS(PH7.4)漂洗3次,每次15min。2、 后固定:1%的鋨酸·0.1M磷酸緩沖液PBS(PH7.4)室溫(20℃)固定2h。0.1M磷酸緩沖液PBS(PH7.4)漂洗3次,每次15min。3、 脫水:組織依次入50%-70%-80%-90%-95%-*-*酒精上行脫水,每次15min。4、 滲透:丙酮︰812包埋劑=1︰1混合液滲透過夜,純812包埋劑滲透過夜。5、 包埋:60℃聚合48h。6、 切片:切片機切片60—80nm超薄切片。7、 染色:鈾鉛雙染色(2%醋酸鈾飽和水溶液,枸櫞酸鉛,各染色15min),切片室溫干燥過夜。8、 透射電子顯微鏡下觀察,采集圖像分析。