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產(chǎn)志賀毒素(STEC)大腸桿菌顯色培養(yǎng)基使用說(shuō)明書(shū)
用于檢測(cè)產(chǎn)志賀毒素(STEC)大腸桿菌
組分
科瑪嘉產(chǎn)志賀毒素大腸桿菌(STEC)基礎(chǔ)培養(yǎng)基和增補(bǔ)劑各一瓶。
基礎(chǔ)培養(yǎng)基:瓊脂 15.0 g/L 蛋白胨和酵母粉 8.0 g/L 鹽類 5.2g/L
色素:2.6 g/L
增 補(bǔ) 劑:10 mL/L
pH值 6.9
操作
1、基礎(chǔ)干粉:取瓶?jī)?nèi)干粉30.8 g溶于1000 mL去離子水的潔凈三角瓶中,充分?jǐn)嚢杌靹?。也可根?jù)需要按照30.8 g/L的比例擴(kuò)大或縮小制備培養(yǎng)基的量。
2、加熱至100℃,不停攪拌,使其*溶解。切勿加熱超過(guò)100℃,切勿121℃高壓滅菌。若使用微波爐加熱,應(yīng)將培養(yǎng)基加熱沸騰,立即移出,輕輕搖勻,再放入微波爐加熱,觀察小氣泡變?yōu)榇髿馀?,直?溶解即可。切勿使培養(yǎng)基溢出。
3、增補(bǔ)劑:取增補(bǔ)劑兩瓶(ST160(S))各加入5mL無(wú)菌水中攪拌混勻,或取增補(bǔ)劑一瓶(ST162(S))加入10mL無(wú)菌水中攪拌混勻。
4、把混勻后的增補(bǔ)劑加入到冷卻至45℃的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,輕輕搖動(dòng)使其充分混勻,傾注平皿,使其凝固,晾干備用。
保存 該成品平板在室溫可保存一天或在冰箱內(nèi)貯存1個(gè)月(2℃~8℃,避光)。未使用完的STEC增補(bǔ)劑在2℃~8℃環(huán)境中可保持2個(gè)月。
接種
劃線或涂布接種(冰箱內(nèi)保存的平板使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫),在36
結(jié)果
微生物(Microorganism) | 菌落顏色 |
產(chǎn)志賀毒素大腸桿菌 (STEC E.coli) | 淡紫色 |
其他腸桿菌(Other Enterobacteriacae) | 藍(lán)色,無(wú)色或抑制 |
革蘭氏陽(yáng)性菌(Gram positive bacteria) | 抑制 |
注:在365nm紫外燈照射下,產(chǎn)志賀毒素大腸桿菌O157菌落無(wú)熒光。 |
性能及局限
一些產(chǎn)志賀毒素大腸桿菌在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)微弱或不生長(zhǎng)。一些罕見(jiàn)的不產(chǎn)毒素大腸桿菌也可能出現(xiàn)紫色熒光菌落。較為罕見(jiàn)的大腸桿菌O157菌落也可能為熒光。最后的鑒定必須通過(guò)補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)。血清學(xué)鑒定可直接從該培養(yǎng)基上挑取菌落進(jìn)行試驗(yàn)。
貯存條件
基礎(chǔ)培養(yǎng)基和增補(bǔ)劑均貯存于15℃~30℃干燥環(huán)境中,在有效期前使用。
污染處理
使用過(guò)的培養(yǎng)基需要在121℃滅菌至少20分鐘才可以按照有關(guān)規(guī)定丟棄。
附:供體外診斷使用,產(chǎn)品須專業(yè)人員操作。